不同防腐剂结合物理方法抑制产衰老激素的微生物效果和机制研究

来源 :浙江工商大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ldkkkkk54
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本文以从果蔬中分离出的产促植物衰老激素的三种致病菌——栖稻假单胞菌(P.oryzihabitans)、藤仓镰刀菌(F.fujikuroi)和损毁链格孢菌(A.destruens)为供试菌,选择两种小分子防腐剂以及紫外线照射、超声处理和热处理三种常见的物理方法,研究了两种小分子防腐剂及三种物理方法对三种致病菌的抑菌性能。并通过分生孢子萌发抑制、荧光发射光谱扫描、电导率及细胞膜的通透性以及细胞壁对防腐剂的吸附实验等几个方面对三种供试菌的抑菌机理进行初步研究。另外,通过紫外分光光度计、高效液相色谱及乙烯检测仪检测了促植物衰老激素冠菌素、脱落酸和乙烯,研究了两种防腐剂以及三种物理方法处理对致病菌产衰老激素的抑制,研究结果如下:(1)脱氢乙酸钠对P.oryzihabitans、F.fujikuroi和A.destruens的MIC分别为3.2 mg/mL、0.2 mg/mL和0.1 mg/mL;对羟基苯甲酸乙酯对P.oryzihabitans、F.fujikuroi和A.destruens的MIC分别为0.8 mg/mL、0.4 mg/mL和0.2 mg/mL。紫外线照射对P.oryzihabitans、F.fujikuroi和A.destruens的最小抑制强度分别为30 s、5 min和15 min;超声处理对P.oryzihabitans、F.fujikuroi和A.destruens的最小抑制强度分别为100 W超声50 min、60 W超声40 min和100W超声40 min;5 min加热处理对P.oryzihabitans、F.fujikuroi和A.destruens的最小抑制强度分别为50、56、46℃。(2)通过分生孢子萌发抑制试验发现,0.4 mg/mL对羟基苯甲酸乙酯处理复配5 min紫外线照射处理对F.fujikuroi分生孢子萌发相对抑制率最高,达92%,超声处理对F.fujikuroi分生孢子萌发抑制效果最差。46℃加热5 min对A.destruens的分生孢子萌发抑制效果最好,孢子萌发抑制率为86%,100 W超声40 min对A.destruens的分生孢子萌发抑制效果最差。(3)三种供试菌经过培养后处理测定其电导率,发现P.oryzihabitans0.8mg/mL对羟基苯甲酸乙酯与热处理复配处理组的电导率最高,F.fujikuroi经过60 W超声40 min复配0.2 mg/mL脱氢乙酸钠处理组的电导率最高,A.destruens经过0.2 mg/mL对羟基苯甲酸乙酯与100 W超声40 min复配处理组的电导率最高,与其它组之间有明显的差异。(4)通过细胞壁成分对防腐剂的吸附实验发现,三种供试菌中P.oryzihabitans的细胞壁对对羟基苯甲酸乙酯和脱氢乙酸钠的吸附量比其他两种真菌高,所以抑菌浓度高于F.fujikuroi和A.destruens。真菌中F.fujikuroi细胞壁对对羟基苯甲酸乙酯吸附量较多,A.destruens细胞壁对脱氢乙酸钠吸附量较多。(5)3.2 mg/mL脱氢乙酸钠、0.8 mg/mL对羟基苯甲酸乙酯和50℃加热5min的处理完全抑制了P.oryzihabitans产冠菌素。除不产冠菌素的处理组,产量最低的是紫外线照射30 s的处理组,每毫升培养基产量为0.038μg/mL,每克菌干重产量为0.147 mg/g。1.6 mg/mL脱氢乙酸钠处理组冠菌素产量最多,每毫升培养基产量为0.217μg/mL,每克菌干重产量为1.447 mg/g。(6)0.4 mg/mL对羟基苯甲酸乙酯和56℃加热5 min的处理组F.fujikuroi脱落酸的产量为0。除不产脱落酸的处理组,产量最低的是0.2 mg/mL脱氢乙酸钠的处理组,每毫升培养基产量为0.010μg/mL,每克菌干重产量为17.759μg/g。0.2 mg/mL对羟基苯甲酸乙酯的处理组脱落酸产量最高,每毫升培养基产量为0.201μg/mL,每克菌干重产量为217.001μg/g。(7)对羟基苯甲酸乙酯是通过减少A.destruens的数量,导致乙烯产量减少,脱氢乙酸钠处理对A.destruens产乙烯的能力抑制,0.1 mg/mL的脱氢乙酸钠对菌产乙烯的抑制率为98%。100 W超声40 min处理后A.destruens乙烯产量最高,46℃热处理5 min后A.destruens乙烯产量最低。超声处理通过减少菌的数量,导致乙烯产量减少,对菌产乙烯的抑制率为28%。紫外处理对菌产乙烯能力有一定抑制,抑制率为49%。热处理抑制菌产乙烯较强,抑制率为72%。
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