【摘 要】
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目的观察NO在ROP模型动物的视网膜组织的水平,探讨分别应用选择性NOS抑制剂L-NNA及L-NIL对ROP模型动物视网膜的新生血管和视网膜组织VEGF蛋白表达的影响。方法1)建立高浓度氧
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目的观察NO在ROP模型动物的视网膜组织的水平,探讨分别应用选择性NOS抑制剂L-NNA及L-NIL对ROP模型动物视网膜的新生血管和视网膜组织VEGF蛋白表达的影响。方法1)建立高浓度氧诱导的Spraque-Dawley(SD)新生鼠ROP模型,随机分成空气组、单纯氧气组、高氧期L-NNA治疗组、高氧期L-NNA对照组、相对低氧期L-NNA治疗组、相对低氧期L-NNA对照组、高氧期L-NIL治疗组及高氧期L-NIL对照组。2)测定吸光度,检测空气组与单纯氧气组分别在高氧期、相对低氧期时新生鼠视网膜cNOS和iNOS活力,反映视网膜NO水平。3)药物治疗:高氧期L-NNA治疗组、相对低氧期L-NNA治疗组在对应的高氧期、相对低氧期,腹腔注射cNOS抑制剂L-NNA的生理盐水液(150mg/kg·d即50ml/kg·d),高氧期L-NNA对照组、相对低氧期L-NNA对照组在相应时期腹腔注射生理盐水液(50ml/kg·d);高氧期L-NIL治疗组和高氧期L-NIL对照组分别在高氧期腹腔注射iNOS抑制剂L-NIL (25mg/kg·d即10ml/kg·d)及生理盐水液(10ml/kg·d)。4)相对低氧期结束时,取各组新生鼠眼球制备HE染色切片,计数视网膜新生血管内皮细胞数;取治疗组与对照组新生鼠完整视网膜,采用Western Blot法检测VEGF蛋白的表达。结果1)单纯氧气组新生鼠视网膜cNOS活力(高氧期0.1953±0.0244U/mgprot,相对低氧期0.1472±0.0149U/mgprot)较空气组(高氧期0.1237±0.0380U/mgprot,相对低氧期0.0959±0.0268U/mgprot)显著增高(P<0.05), iNOS活力明显降低(空气组高氧期0.2192±0.0882U/mgprot,单纯氧气组高氧期0.1077±0.0430U/mgrot) (P<0.05)。2) L-NNA治疗组与对照组比较,视网膜新生血管内皮细胞数(高氧期L-NNA治疗组89.19±11.86个/片,高氧期L-NNA对照组135.18±22.99个/片,相对低氧期L-NNA治疗组79.62±10.87个/片,相对低氧期L-NNA对照组135.15±23.36个/片)显著减少(P<0.05)、视网膜VEGF表达在高氧期增加60.38%在相对低氧期减少17.97%,以上指标在L-NIL治疗组与对照组均无明显变化(P>0.05)。结论抑制cNOS产生的NO能减少后者引起的血管活性以及细胞毒性效应,从而减轻对血管内皮细胞的损伤,并且能下调视网膜VEGF的表达,最终抑制视网膜新生血管的形成。
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