【摘 要】
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在本实验室分离的迟缓爱德华氏菌中克隆得到了热激蛋白基因dnaJ、dnaK和htpG。将这三个基因在大肠杆菌中表达，得到重组蛋白。酶活性分析发现，DnaK和HtpG具有明显的ATP酶活性，Htp
【出 处】
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中国科学院研究生院 中国科学院大学
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在本实验室分离的迟缓爱德华氏菌中克隆得到了热激蛋白基因dnaJ、dnaK和htpG。将这三个基因在大肠杆菌中表达，得到重组蛋白。酶活性分析发现，DnaK和HtpG具有明显的ATP酶活性，HtpG最适酶活温度在30℃和40℃之间。发现DnaJ能够促进DnaK的ATP酶活性，并且利用pull down的方法证明了DnaJ与DnaK之间存在相互作用。运用。Real-Time PCR的手段分别检测了dnaJ、dnaK和htpG在高温和过氧化氢两个压力条件下的表达，发现其表达量皆上调。为了检测dnal和htpG在迟缓爱德华氏菌中的功能，分别构建了dnaJ和htpG突变菌株TXJ和TXHG。通过动物实验和细胞水平的检测，发现突变株的毒力明显下降。以牙鲆为动物模型，检测了DnaJ和HtpG的免疫保护效率，发现其相对保护率分别达到62.2％和53.1％。
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