目的:本研究主要通过分离培养原代人RPE细胞,并对其鉴定,比较原代人RPE细胞和ARPE19细胞的生长特性;探讨YM155对原代人RPE细胞和ARPE19细胞生存、增殖、迁徙和凋亡的影响及其作用机制,尝试为PVR的防治提供一些理论依据。方法:用胰蛋白酶消化法分离培养鉴定原代人RPE细胞。通过免疫荧光染色检测原代人RPE细胞和ARPE19细胞RPE65、CRALBP、ZO-1和EGFR蛋白表达。使用i C ELLigence实时无标记细胞功能分析仪检测原代人RPE细胞和ARPE19细胞的生长曲线。用si RNA干扰原代人RPE细胞和ARPE19细胞EGFR的表达。用噻唑蓝法（MTT）和流式细胞术检测YM155对原代人RPE细胞和ARPE19细胞活力的影响。用5-溴脱氧尿嘧啶核苷（Brdu）标记法检测YM155对原代人RPE细胞和ARPE19细胞增殖的影响。通过细胞划痕法分析YM155对原代人RPE细胞和ARPE19细胞迁徙的影响。使用免疫荧光检测YM155对原代人RPE细胞和ARPE19细胞EGFR蛋白表达的影响。使用免疫印迹检测YM155对原代人RPE细胞和ARPE19细胞EGFR蛋白、ERK蛋白、磷酸化ERK蛋白、JNK蛋白、磷酸化JNK蛋白、P38蛋白、磷酸化P38蛋白的影响。结果:用胰蛋白酶消化法成功分离培养出原代人RPE细胞,所分的细胞纯度较高。免疫荧光染色显示原代人RPE细胞和ARPE19细胞RPE65蛋白、CRALBP蛋白、ZO-1蛋白和EGFR蛋白均有显著表达。ARPE19细胞的细胞指数高于P3和P4代原代人RPE细胞。si RNA干扰实验结果显示EGFR si RNA在原代人RPE细胞中对的EGFR蛋白下调作用强于在ARPE19细胞中的作用。MTT结果显示YM155抑制原代人RPE细胞和ARPE19细胞的活力,并且呈剂量依赖性和时间依赖性。流式细胞检测显示YM155对原代人RPE细胞无显著影响,高浓度的YM155诱导了少量的ARPE19细胞凋亡和坏死。YM155抑制原代人RPE细胞和ARPE19细胞的增殖,也可抑制EGF诱导的原代人RPE细胞和ARPE19细胞的增殖。细胞划痕实验结果显示YM155抑制原代人RPE细胞和ARPE19细胞的迁徙,也抑制了EGF诱导的原代人RPE细胞和ARPE19细胞的迁徙。免疫印迹检测显示YM155下调原代人RPE细胞和ARPE19细胞EGFR蛋白和磷酸化ERK蛋白的表达,同时上调磷酸化P38蛋白和磷酸化JNK蛋白的表达;此外YM155可抑制EGF诱导的磷酸化EGFR蛋白和磷酸化ERK蛋白表达增高。免疫荧光染色显示YM155可诱导原代人RPE细胞和ARPE19细胞的骨架破坏,EGFR蛋白的内吞。结论:通过胰蛋白酶消化法可成功培养出高纯度的原代人RPE细胞。原代人RPE细胞和ARPE19细胞均表达RPE65蛋白、CRALBP蛋白、ZO-1蛋白和EGFR蛋白。ARPE19细胞的增殖能力强于原代人RPE细胞。YM155对人RPE细胞生存、增殖和迁徙的抑制作用与EGF/EGFR/MAPK信号通路密切相关,可能对PVR中RPE细胞的异常存活具有一定的抑制作用。