【摘 要】
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坛紫菜(Pyropia haitanensis)是我国南方沿海传统大宗的水产养殖品种,然而全球气候变暖已逐渐成为影响坛紫菜产量和质量的重要环境因素。为保证坛紫菜栽培的可持续发展,国内多个
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坛紫菜(Pyropia haitanensis)是我国南方沿海传统大宗的水产养殖品种,然而全球气候变暖已逐渐成为影响坛紫菜产量和质量的重要环境因素。为保证坛紫菜栽培的可持续发展,国内多个课题组选育出了多个耐高温型坛紫菜新品系,并已在生产上大面积推广应用,取得了显著的经济效益,但目前对这些耐高温型新品系的高温抗性机理仍不清楚。本实验采用叶绿素荧光测量技术以及iTRAQ定量差异蛋白质组学技术对坛紫菜耐高温型品系Z-61叶状体的高温胁迫抗性机制进行了初步研究,主要研究结果如下: 1、采用叶绿素荧光测量技术比较了坛紫菜叶状体在不同暗处理时间、诱导曲线不同测量点的时间间隔、不同光照强度下的光合作用效率以及光合作用日变化,并通过数据统计分析结果表明坛紫菜光合作用效率测定时的的最佳参数设置为:PAR为100μmol·m-2·s-1,诱导曲线测量点时间间隔为30s,叶状体暗处理时间为15min,每天最佳的测量时间为:10:30~6:30。 2、采用叶绿素荧光测量技术比较了坛紫菜耐高温型品系Z-61和野生型品系叶状体在高温(29℃)胁迫不同时间水平(0h、3h、6h、12h、24h、48h、96h、144h)下的的光合作用效率,结果表明Z-61品系在高温胁迫下比野生型品系的光合作用效率衰减速度更为缓慢,衰减的程度也更低;并且Z-61品系在长时间的高温胁迫下光保护能力仍然能恢复到初始水平,而野生型则无法恢复。从实验结果中还可以看出高温胁迫48h为Z-61品系的耐高温极限时间点,而野生型品系的耐高温极限时间点则要早得多,为24h。这些结果说明Z-61品系比野生型品系具有更强的耐高温性能。 3、采用iTRAQ技术对坛紫菜耐高温型品系Z-61叶状体在高温胁迫不同水平(0h、3h、6h、12h、24h、48h、96h、144h)下的蛋白质组学进行定量差异比较,共筛选出与坛紫菜高温胁迫应答相关蛋白283个。对这些差异表达蛋白进行功能富集分析,结果发现在高温胁迫下,坛紫菜叶状体细胞内会合成并累积各种应激蛋白以及抗氧化剂来减少高温胁迫对细胞的损伤,并通过抑制光合作用、蛋白氨基酸代谢、呼吸代谢等其它生物代谢过程,以积蓄能量应对高温胁迫对机体的损伤,并维持细胞内的代谢平衡和机体的正常生长。 4、结合高温胁迫不同时间水平光合效率参数的测定结果,以及定量差异蛋白质组学的分析结果,可知坛紫菜耐高温型品系Z-61的耐高温特性主要体现在比野生型品系对高温的感知更敏感,并能更快地针对高温胁迫引起的体内代谢失常现象做出应激反应,进行及时修复和维持细胞内的代谢平衡,从而使得耐高温品系可以在较长时间的高温胁迫下正常生长。
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