论文部分内容阅读
目的:基于MRI-病理对照,研究裸鼠纤维肉瘤模型DWI-ADC值与其Ki-67、Bcl-2及P53表达的相关性。材料与方法:一、研究材料（一）研究细胞及动物人纤维肉瘤细胞株HT1080;雌性Balb/c nu/nu鼠,22只。（二）研究试剂 MEM培养基、Ki-67抗体、Bcl-2抗体、P53抗体。（三）研究器材 超净工作台、3.0T MRI扫描仪。二、研究方法（一）裸鼠纤维肉瘤模型建立 HT1080细胞接种至裸鼠右后肢大腿。（二）裸鼠纤维肉瘤模型MR成像 裸鼠纤维肉瘤模型进行T1WI、T2WI、DWI检查,采用GE ADW4.7 Functool后处理软件获取ADC图,两名观察者采用四种ROI勾画方法（椭圆形、自由形状、小圆形及全肿瘤ROI勾画方法）,分别测量ADC值。（三）裸鼠纤维肉瘤模型MRI-病理对照方法 裸鼠麻醉后,使用维生素E胶丸对肿瘤标记,后进行MRI检查。扫描完成后,使用手术线再次进行肿瘤标记,完整肿瘤大体标本于甲醛水溶液浸泡固定后,沿手术标记线进行肿瘤标本病理取材。（四）裸鼠纤维肉瘤模型HE染色及观察（五）裸鼠纤维肉瘤模型免疫组化染色及观察三、观察指标:（一）裸鼠纤维肉瘤模型肿瘤体征表现（二）裸鼠纤维肉瘤模型MRI表现（三）裸鼠纤维肉瘤模型组织病理学表现四、统计学方法 采用SPSS 26.0及Med Calc 15.6进行实验结果分析。采用组内相关系数和Bland-Altman散点图评估两位观察者测量ADC值的一致性。根据正态及方差分析结果,采用配对t检验或Wilcoxon检验比较不同ROI勾画方法测得ADC值;采用Pearson或Spearman相关系数检验对ADC值与Ki-67、Bcl-2、P53表达进行相关性分析。结果:一、裸鼠纤维肉瘤模型肿瘤体征表现 22例裸鼠纤维肉瘤模型成瘤时间为23-30天,肿瘤体积约655～1272 mm~3。二、裸鼠纤维肉瘤模型MRI表现（一）常规MRI表现 T1WI呈等或稍高信号,T2WI呈高或混杂信号,部分可见条状低信号分隔影。（二）DWI表现DWI呈高低混杂信号。椭圆形、自由形状、小圆形、全肿瘤ROI勾画方法测得ADC值具有极好的观察者间一致性,ADC值分别为0.479±0.097×10-3mm~2/s,0.490±0.103×10-3mm~2/s,0.415±0.085×10-3mm~2/s,0.64±0.109×10-3mm~2/s。各ROI勾画方法与全肿瘤ROI勾画方法ADC值比较均有差异。三、裸鼠纤维肉瘤模型组织病理学表现（一）常规病理表现 肿瘤大体标本呈类圆形或不规则形,质软,组织切面呈鲜红色、灰白色,附着骨生长,肿瘤内可见出血及坏死区域。肿瘤细胞排列不均,部分排列紧密,细胞呈梭形或类圆形,核大深染,有异形性,偶有畸形或多个核;可见不规则坏死区及肌肉浸润表现。（二）Ki-67、Bcl-2、P53表达 22例裸鼠纤维肉瘤模型的Ki-67阳性表达为肿瘤细胞核呈棕褐色;Bcl-2表达为细胞质呈棕黄或淡黄色;P53表达为肿瘤细胞核呈棕黄色。Ki-67表达平均值为77.8±4.2%,Bcl-2表达平均值为77.0±5.1%,P53表达平均值为78.8±11.3%。四、裸鼠纤维肉瘤模型DWI参数与Ki-67、Bcl-2、P53表达相关性（一）DWI参数与Ki-67表达相关性 经过统计分析,发现椭圆形、自由形状、小圆形、全肿瘤ROI勾画方法测得ADC值均与Ki-67呈中度负相关（r=-0.628,r=-0.644,r=-0.646,r=-0.441;P均＜0.05）。（二）DWI参数与Bcl-2表达相关性 经过统计分析,发现椭圆形、自由形状、小圆形、全肿瘤ROI勾画方法测得ADC值均与Bcl-2呈中度负相关（r=-0.579,r=-0.566,r=-0.607,r=-0.437;P均＜0.05）。（三）DWI参数与P53表达相关性 经过统计分析,发现4种ROI勾画方法的ADC值均与P53表达无相关性。结论:我们通过建立22例裸鼠纤维肉瘤模型,基于MRI-病理对照,首次开展纤维肉瘤DWI参数与其Ki-67、Bcl-2、P53表达相关性分析,得出如下结论:一、裸鼠纤维肉瘤模型椭圆形、自由形状、小圆形及全肿瘤ROI勾画方法测得DWI-ADC值均具有极好的观察者间一致性,其中全肿瘤勾画方法最佳,小圆形勾画方法较差;不同的ROI勾画方法对DWI-ADC值有影响。二、裸鼠纤维肉瘤模型的DWI-ADC值与其Ki-67表达有相关性,且呈中等负相关,即:随着裸鼠纤维肉瘤模型DWI-ADC值增大,其Ki-67表达水平降低。为临床上通过DWI参数预测纤维肉瘤Ki-67表达奠定理论基础。三、裸鼠纤维肉瘤模型的DWI-ADC值与其Bcl-2表达有相关性,且呈中等负相关,即:随着裸鼠纤维肉瘤模型DWI-ADC值增大,其Bcl-2表达水平降低。为临床上通过DWI参数预测纤维肉瘤Bcl-2表达奠定理论基础。。四、裸鼠纤维肉瘤模型的DWI-ADC值与其P53表达无相关性。