【摘 要】
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猴头菇,亦称猴头菌[Hericium erincaceus（Bull.）Pers],是一种食药两用菌,自有历史记载以来已被广泛应用于传统美食和中药之中。其中,猴头菇多糖被普遍认为是猴头菇的一种主要活性成分,其具备抗炎、抗氧化、抗肿瘤及体内抗肝损伤等多种功效。但是,截至目前,基于体外细胞模型研究猴头菇多糖及其改性物对胃损伤的保护作用的报道相对较少。本文以猴头菇子实体为原料,分别制备了猴头菇的粗多糖（
【基金项目】
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广东省科技计划项目2013B090600008; 广东太阳神集团有限公司资助项目:猴头菇多糖提取物对动物胃黏膜细胞保护及抗过敏、调节机体免疫等功能活性研究
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猴头菇,亦称猴头菌[Hericium erincaceus（Bull.）Pers],是一种食药两用菌,自有历史记载以来已被广泛应用于传统美食和中药之中。其中,猴头菇多糖被普遍认为是猴头菇的一种主要活性成分,其具备抗炎、抗氧化、抗肿瘤及体内抗肝损伤等多种功效。但是,截至目前,基于体外细胞模型研究猴头菇多糖及其改性物对胃损伤的保护作用的报道相对较少。本文以猴头菇子实体为原料,分别制备了猴头菇的粗多糖（HEPC）、纯化多糖(HEPW1、HEPN)和纯化多糖的磷酸化衍生物（P-HEPN）,对研究涉及的活性物质进行了结构表征、理化特征分析,并且借助细胞生物学方法探究了活性物质对人胃粘膜上皮细胞（GES-1）损伤的保护作用及其潜在途径。主要研究结果如下:（1）HEPC的重均分子量Mw为14.762 k Da;热重分析显示,HEPC具备良好的热稳定性,其热分解的温度拐点在256.39℃;细胞建模以及细胞活力测定实验显示,HEPC对H2O2、CH3COOH诱导的GES-1细胞损伤具有保护作用,然而HEPC对C2H5OH诱导的GES-1细胞损伤几乎没有保护作用。（2）纯化多糖组分HEPW1和HEPN的重均分子量Mw分别为5.163 k Da和12.713k Da;二者均含有α-型糖苷键,且均呈无定型结构;单糖组成分析表明,HEPW1主要由岩藻糖（6.13%）、葡萄糖（72.28%）和半乳糖（21.59%）组成,HEPN则主要由甘露糖（5.13%）、葡萄糖（43.02%）和半乳糖（51.85%）组成;HEPW1和HEPN的水溶液均表现出假塑性流体行为并且二者的水溶液体系均不能形成单分散体系。（3）HEPW1可通过恢复细胞活力、调节细胞周期、抑制细胞凋亡、增强受损GES-1细胞的胞内物质的抗氧化能力以及增强受损GES-1细胞的胞内抗氧化酶系统的调节能力等途径修复H2O2诱导的GES-1细胞氧化损伤;HEPN可通过恢复细胞活力、抑制细胞坏死、减少ROS生成以及减轻H2O2诱导的GES-1细胞线粒体功能障碍等途径预防H2O2诱导的GES-1细胞氧化损伤。（4）纯化多糖的磷酸化衍生物P-HEPN的产率和磷酸根含量分别为19.3%、7.95%;结合SEM、NMR分析结果可知P-HEPN为具有低取代度的磷酸化衍生物;溶解性能测试结果表明,在加热环境中P-HEPN比HEPN具有更理想的溶解度;体外抗氧化性能测试结果表明,磷酸基团的添加有助于P-HEPN的抗氧化能力的提高;体外耐酸性能测试结果表明,P-HEPN耐受低浓度有机酸的干扰。（5）P-HEPN可通过恢复细胞活力、促进细胞增殖、抑制细胞坏死、维持受损GES-1细胞的基本分泌功能和缓解受损GES-1细胞的线粒体功能障碍等途径修复CH3COOH诱导的GES-1细胞急性损伤。
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