论文部分内容阅读
衰老是一个无法抵制的天然生理过程,抗衰老一直是一个热门的研究课题。黑加仑提取物在很多研究中被发现具有抗氧化,降脂,抗肿瘤等生理活性。本文结合网络药理学预测和分子对接模拟研究了黑加仑提取物在黑腹果蝇体内的抗衰老作用及其作用机制。在这项工作中,以黑腹果蝇为模式生物,探索了不同浓度的黑加仑提取物(0.2mg/m L,1 mg/m L,2 mg/m L)对果蝇延缓衰老,延长寿命的作用。结果显示,黑加仑提取物延长了果蝇的寿命,改善了其运动能力,但对体重和摄食量没有显著影响。本文建立了不同应激条件下的果蝇模型,来探究黑加仑提取物对果蝇抗逆性的影响。结果发现,黑加仑提取物可以改善果蝇在各种应激条件下(氧化应激,热应激,饥饿应激)的生存时间。同时发现,黑加仑提取物改善了果蝇肠道微生物环境,增强了果蝇的肠道屏障功能,抑制了肠道干细胞的异常增殖,并且增加了肠道内自噬溶酶体的数量。在RNAi果蝇验证实验中发现,所有RNAi果蝇的寿命都比野生型w1118果蝇短,而且,测定了自噬相关的RNAi果蝇的运动能力后发现,Atg5 RNAi和Atg8a RNAi果蝇的运动能力在干预黑加仑提取物后并没有提高。本文进一步探索了黑加仑提取物延缓衰老的分子机制,研究发现黑加仑提取物能够明显增加过氧化氢酶(Catalase,CAT)和超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)的基因表达水平,显著降低PI3K,Akt-1和m TOR的基因表达水平,并且显著升高了下游自噬基因Atg1,Atg5,Atg8a和Atg8b的表达水平,但不影响sir-2基因,说明黑加仑提取物通过抑制PI3K-Akt途径和m TOR途径,并激活自噬途径来延缓衰老,而且这一过程并不依赖于饮食限制通路。同时,Hsp70基因表达水平的提高表明黑加仑提取物在不利环境中抗逆性的增强可能是Hsp70基因的作用。本文的研究结果为黑加仑开发抗衰老相关的功能食品提供了理论依据。