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目的：尿石素A是石榴、树莓、花生等食物经过肠道菌群消化产生的具有生物活性的多酚类物质，对多种疾病产生抗氧化、抗炎、诱导自噬等保护功效。本研究旨在探究尿石素A(Urolithin A, UA)对高糖所致的内皮细胞损伤的保护作用，研究其发挥保护作用的可能机制。
方法：体外培养人脐静脉内皮细胞株，高糖(33.3mM葡萄糖)培养基模拟内皮细胞高糖损伤。CCK-8检测不同浓度尿石素A(0.1μM，1μM，10μM，50μM)对细胞增殖活力影响，确定最适干预浓度。RT-PCR检测细胞内皮素(Endothelin-1, ET-1)、内皮型一氧化氮合酶(Endothelial Nitric Oxide Synthase, eNOS)和腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase, AMPK)mRNA表达量。后续研究分为①正常组(5.5mM葡萄糖)、②高糖组(33.3mM葡萄糖)、③高糖+UA处理组、④高糖+UA+CompoundC处理组。生化试剂盒检测细胞的一氧化氮(NO)分泌量，Elisa试剂盒检测内皮细胞ET-1释放量，以确定尿石素A对内皮细胞功能的影响。通过DHE荧光探针染色和超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase, SOD)活性分析细胞氧化应激水平。采用PCR和Westernblotting检测eNOS、AMPK的表达及蛋白磷酸化水平。
结果：与正常浓度葡萄糖比较，高糖培养明显降低了细胞存活(P＜0.05)，尿石素A(1μM-10μM)呈剂量依赖性提高内皮细胞的存活，10μM和50μM组无明显差异,后续实验干预浓度取10μM。尿石素A干预后可明显改善高糖损伤，内皮细胞ET-1在mRNA水平表达量降低，SOD活性升高(P＜0.05)，活性氧簇((Reactiveoxygenspecies,ROS)水平降低(P＜0.05)；NO释放增多和ET-1分泌减少(P＜0.05)；尿石素A可明显上调AMPK和eNOS磷酸化水平(P＜0.05)，对其表达总量无明显影响，而在AMPK抑制剂CompoundC处理后尿石素A对内皮细胞的上述作用被逆转。
结论：一定浓度的尿石素A可以增加高糖环境下内皮细胞的存活，通过激活AMPK/eNOS通路，抑制高糖介导的血管内皮氧化应激水平，维持NO/ET-1分泌的动态平衡改善内皮功能障碍，发挥保护作用。
方法：体外培养人脐静脉内皮细胞株，高糖(33.3mM葡萄糖)培养基模拟内皮细胞高糖损伤。CCK-8检测不同浓度尿石素A(0.1μM，1μM，10μM，50μM)对细胞增殖活力影响，确定最适干预浓度。RT-PCR检测细胞内皮素(Endothelin-1, ET-1)、内皮型一氧化氮合酶(Endothelial Nitric Oxide Synthase, eNOS)和腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase, AMPK)mRNA表达量。后续研究分为①正常组(5.5mM葡萄糖)、②高糖组(33.3mM葡萄糖)、③高糖+UA处理组、④高糖+UA+CompoundC处理组。生化试剂盒检测细胞的一氧化氮(NO)分泌量，Elisa试剂盒检测内皮细胞ET-1释放量，以确定尿石素A对内皮细胞功能的影响。通过DHE荧光探针染色和超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase, SOD)活性分析细胞氧化应激水平。采用PCR和Westernblotting检测eNOS、AMPK的表达及蛋白磷酸化水平。
结果：与正常浓度葡萄糖比较，高糖培养明显降低了细胞存活(P＜0.05)，尿石素A(1μM-10μM)呈剂量依赖性提高内皮细胞的存活，10μM和50μM组无明显差异,后续实验干预浓度取10μM。尿石素A干预后可明显改善高糖损伤，内皮细胞ET-1在mRNA水平表达量降低，SOD活性升高(P＜0.05)，活性氧簇((Reactiveoxygenspecies,ROS)水平降低(P＜0.05)；NO释放增多和ET-1分泌减少(P＜0.05)；尿石素A可明显上调AMPK和eNOS磷酸化水平(P＜0.05)，对其表达总量无明显影响，而在AMPK抑制剂CompoundC处理后尿石素A对内皮细胞的上述作用被逆转。
结论：一定浓度的尿石素A可以增加高糖环境下内皮细胞的存活，通过激活AMPK/eNOS通路，抑制高糖介导的血管内皮氧化应激水平，维持NO/ET-1分泌的动态平衡改善内皮功能障碍，发挥保护作用。