目的:探索Ambra1对结直肠癌细胞增殖和迁移的作用,以及或许的通路机理。方法:汇集医院临床上结直肠癌患者术后标本和无癌的癌组织旁结构,收组织标本的RNA和蛋白质,利用QPCR和Western-Blot实验了解Ambra1 mRNA和蛋白在所有标本间的表达状况,另外,运用雷同的实验研究方法检测Ambra1 mRNA和蛋白在结直肠癌细胞系和正常肠肠粘膜细胞系(NCM460)的表达状况,购买相关siRNA靶向敲低结直肠癌细胞(SW480和HCT15)基因Ambra1的表达程度,运用QPCR和Western-Blot实验检测siRNA的的作用效率,Colony实验和实时无标记细胞分析(real time cellular analysis,RTCA)实验被用于检验siRNA-Ambra1对结直肠癌细胞SW480和HCT15克隆构成和增殖本领的影响,Transwell迁移、侵袭试验和划痕愈合实验用来查验siRNA-Ambra1对结直肠癌细胞系SW480和HCT15迁移和侵袭本领的作用效果,Western-Blot实验用于了解siRNA-Ambra1对结直肠癌细胞系(SW480和HCT15)细胞上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)关联蛋白(N-cadherin、E-cadherin和Vimentin)、细胞外信号调节激酶(extracellular singal-regulated kinase,ERK)信号机制联系蛋白和c-myc蛋白表达情况的影响。并构建稳定低表达Ambra1结直肠癌细胞株(HCT116和KM12),进行动物体内实验(动物成瘤实验)。结果:Ambra1在无癌肠粘膜组织(癌旁结构)和正常肠粘膜上皮细胞系(NCM 460)中展现出高表达状态。siRNA-Ambra1可以明显敲低结直肠癌细胞(SW480和HCT15)有关Ambra1的mRNA和蛋白的表达(P值均<0.05),增进结直肠癌细胞SW480和HCT15细胞的克隆构成、增殖、迁移和侵袭本领(P值均<0.05)。当将siRNA-Ambra1转染至结直肠癌细胞后,能够使SW480和HCT15细胞中N-cadherin、E-cadherin蛋白呈现EMT转变(P<0.05),而ERK1/2(phosphorylated ERK1/2,p-ERK1/2)磷酸化更加多(P<0.05)。在体内,敲低Ambra1能增进结直肠癌细胞的增殖本领(P<0.05)。结论:在人类体内,Ambra1是一个保护性因子,下调基因Ambra1的表达或许使细胞上皮-间质转化和细胞外信号调节激酶信号机制活性增加,进而提高结直肠癌SW480和HCT15细胞的增殖、迁移和侵袭本事,下调Ambra1能增进结直肠癌肿瘤细胞的成长。即Ambra1或许有可以下调结直肠癌细胞的增殖本领。