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研究背景及目的:酒精性慢性胰腺炎(alcoholic chronic pancreatitis,ACP)的发病率逐年升高,因此,有关ACP的发生和发展机制受到科学家们的关注。近年来的研究发现G-细菌内毒素脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)在许多疾病的发生和发展起着重要的作用。LPS通过与模式识别受体(Toll-like receptor 4,TLR4)结合引起级联式炎症反应造成器官损伤。但是LPS-TLR4通路在ACP胰腺纤维化的确切作用和机制尚不十分明确。本研究目的是通过大鼠整体模型和胰腺星状细胞(pancreatic stellate cells,PSC)水平研究LPS-TLR4通路在酒精性性胰腺纤维化形成中的作用与机制。材料和方法:将48只体重120g±20g SD雄性大鼠随机分为两大组分别接受Lieber-De Carli酒精饲料和对照饲料喂养至10周末,于8周末再随机分为4组:(1)对照饲料喂养组;(2)对照饲料喂养加LPS组;(3)酒精饲料喂养组;(4)酒精饲料喂养加LPS组。8周末开始于(2)和(4)组每周经尾静脉注射LPS一次(3mg/kg),共3次,对照组注射生理盐水1ml。所有大鼠造模结束被采集胰腺组织标本。采用胰腺星状细胞系(RP-2细胞)进行体外研究。采用HE染色评价胰腺炎症程度,苯胺蓝染色评价胰腺胶原沉积程度。免疫组化法检测FSP-1和F4/80分别识别PSC和巨噬细胞。采用免疫荧光双染法检测PSC表达TLR4,巨噬细胞表达TLR4和TGF-β1。采用ELISA法检测胰腺I型胶原A1的含量。采用Western blot法检测RP-2细胞上Collagen I,Bambi,p Smad及NF-κB亚单位p65和p50变化。采用荧光定量RT-PCR检测胰腺细胞因子和RP-2细胞Bambi和Collagen I m RNA转录变化。结果:大鼠整体实验研究发现:LPS可引起酒精喂养和正常饮食喂养大鼠胰腺炎症和纤维化程度加重。LPS可激活TLR4通路引起PSC和巨噬细胞增殖,巨噬细胞表达TGF-β1增强。LPS可引起胰腺组织MCP-1、RANTES、TNFα和IL-6等炎症因子m RNA转录水平升高。体外研究发现LPS明显增加TGF-β1诱导的RP-2细胞胶原合成,其机制与LPS-TLR4通路活化可有效抑制RP-2细胞TGF-β1伪受体Bambi的合成有关,与TGF-β/smad通路无关。进一步研究结果显示:LPS与TLR4结合可激活RP-2细胞My D88-NF-κB信号通路,推测其与PSC介导I型胶原合成有关。结论:LPS是引起酒精性慢性胰腺炎胰腺纤维化形成的重要因素。LPS可以激活胰腺巨噬细胞和PSC释放致炎因子和I型胶原的合成。LPS-TLR4通路通过抑制Bambi上调TGF-β1诱导PSC合成I型胶原。抑制LPS-TLR4通路可能成为ACP抗胰腺纤维化的重要途径。