【摘 要】
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目的:通过建立不同动物模型评价秦氏消痹凝胶贴膏药效,探寻其作用机制。方法:1.建立膝骨关节炎小鼠模型,每组动物均给予相应的药物治疗。采用HE染色法观察各组动物软骨损伤程度,ELISA法检测各组动物血清MMP-3、CTX-Ⅱ含量表达情况,评价秦氏消痹凝胶贴膏醇提浸膏药效;2.检测秦氏消痹凝胶贴膏的初黏性、持黏性、恒温持粘性,协同感官评分,计算其综合评分;3.运用热板法、醋酸扭体法、二甲苯急性耳肿胀法
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目的:通过建立不同动物模型评价秦氏消痹凝胶贴膏药效,探寻其作用机制。方法:1.建立膝骨关节炎小鼠模型,每组动物均给予相应的药物治疗。采用HE染色法观察各组动物软骨损伤程度,ELISA法检测各组动物血清MMP-3、CTX-Ⅱ含量表达情况,评价秦氏消痹凝胶贴膏醇提浸膏药效;2.检测秦氏消痹凝胶贴膏的初黏性、持黏性、恒温持粘性,协同感官评分,计算其综合评分;3.运用热板法、醋酸扭体法、二甲苯急性耳肿胀法建立动物疼痛和肿胀模型,各组给予相应的药物处理,验证秦氏消痹凝胶贴膏的镇痛抗炎作用;4.建立膝骨关节炎大鼠模型,各组动物给予相应的药物处理。采用Mankin评分对动物软骨损伤程度进行评价,ELISA法检测各组大鼠血清IL-1β、MMP-1、MMP-3、MMP-13、CTX-Ⅱ的含量表达,免疫组化法及蛋白印迹法检测各组大鼠关节软骨MMP-3的表达,小动物超声探查各组动物的关节腔变化,评价秦氏消痹凝胶贴膏药效。结果:1.与模型对照组相比,各处理组动物血清MMP-3、CTX-Ⅱ含量显著降低(P<0.01);秦氏消痹凝胶贴膏醇提物高剂量组与低剂量组抑制小鼠血清MMP-3表达效果优于扶他林对照组(P<0.01);2.秦氏消痹凝胶贴膏综合评分为80分,制备工艺稳定;3.与模型对照组比较,秦氏消痹凝胶贴膏高剂量组在给药1h、3h后能够显著延长小鼠痛阈值(P<0.05);各处理组均可抑制小鼠疼痛扭体反应及小鼠耳肿胀度(P<0.01),秦氏消痹凝胶贴膏高剂量组抑制小鼠疼痛扭体反应及小鼠耳肿胀度的效果优于扶他林对照组(P<0.05);4.血清检测指标,与模型对照组相比,各处理组动物血清MMP-3、MMP-13、CTX-Ⅱ含量均显著减少(P<0.05),秦氏消痹凝胶贴膏高剂量组及扶他林对照组动物血清MMP-1含量明显减少(P<0.05),除秦氏消痹凝胶贴膏低剂量组外,其余各处理组动物血清IL-1β含量均明显减少(P<0.05),秦氏消痹凝胶贴膏高剂量组抑制动物血清IL-1β表达的效果优于扶他林对照组(P<0.05);超声结果显示,除秦氏消痹凝胶贴膏低剂量组外,其余各处理组动物膝关节软组织肿胀度均明显减轻(P<0.01);免疫组化结果显示,除秦氏消痹凝胶贴膏低剂量组外,其余各处理组动物膝关节软骨MMP-3表达均明显减少(P<0.05);蛋白印迹结果显示,秦氏消痹凝胶贴膏高剂量组及扶他林对照组动物膝关节软骨MMP-3表达明显减少(P<0.01),Mankin评分结果显示,与模型对照组相比,除秦氏消痹凝胶贴膏低剂量组外,其余各用药组Mankin评分明显减少,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:秦氏消痹凝胶贴膏具有良好的镇痛抗炎作用,能够下调膝骨关节炎模型动物MMPs、CTX-Ⅱ和IL-1β的表达。
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