猪繁殖与呼吸综合征病毒（porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV）感染会导致母猪出现繁殖障碍、仔猪呼吸系统受损及免疫抑制,严重危害猪群健康及养猪业经济发展。胸腺是猪的重要中枢免疫器官,在抵御病原入侵、维持机体免疫功能等方面至关重要。PRRSV感染导致胸腺受损,是猪群免疫力下降、继发感染的重要原因,但是目前胸腺损伤的具体机制尚未阐明。本研究拟通过构建PRRSV感染仔猪模型,借助组织病理学观察、免疫组化染色等手段探究PRRSV感染导致胸腺损伤的具体表现。基于Illumina平台,完成对照组及感染组仔猪胸腺组织转录组测序工作,以探究相关差异表达基因及信号通路与胸腺损伤之间的关联。研究结果如下:1.PRRSV感染仔猪模型的构建本研究对感染组11头40日龄鄂通仔猪肌肉注射3m L PRRSV WUH3株病毒悬液（10~6 PFU/m L）,3头仔猪作为对照组,注射等剂量RPMI-1640培养基。感染仔猪从第4天开始出现体温升高,第8天时体温最高可达42-43℃。仔猪临床症状为厌食、不愿走动、咳嗽及呼吸困难。感染仔猪肺、胸腺、淋巴结、扁桃体和脾中检测到病毒核酸,血清中检测到PRRSV抗体。大体剖检及组织病理学观察可见肺呈间质性肺炎。结合以上结果可知PRRSV感染仔猪模型建立成功。2.免疫器官的剖检病变及组织病理学变化PRRSV感染仔猪胸腺体积明显减小,肺门淋巴结、下颌淋巴结、腹股沟淋巴结及脾体积增大。感染组仔猪的胸腺及扁桃体表面散在分布出血点;淋巴结及脾表面因出血而呈暗红色。经组织病理学观察,发现感染仔猪胸腺组织的淋巴细胞坏死且数量减少;淋巴结出血、皮质与髓质结构模糊、淋巴细胞大量减少;扁桃体的淋巴小结中心有大量坏死的淋巴细胞;脾脏红髓淤血。结合以上结果可知PRRSV感染对仔猪免疫器官造成严重损伤。3.胸腺损伤的组织病理学观察胸腺皮质主要病变为皮质萎缩、细胞凋亡及坏死、血管增生、巨噬细胞增多。在胸腺髓质中观察到胸腺小体增生。此外,胸腺小叶间质增宽。免疫组化及免疫荧光染色结果显示PRRSV定位于巨噬细胞细胞质内。结合胸腺组织病理学观察结果猜想,PRRSV入侵仔猪胸腺巨噬细胞,导致胸腺细胞凋亡及坏死,动物机体免疫防御功能使得胸腺皮质血管增生,血液中的单核细胞迁移至胸腺发育成巨噬细胞,造成巨噬细胞增多,病毒可进一步复制再释放,侵染巨噬细胞。4.PRRSV感染仔猪胸腺组织转录学分析结果GO富集分析中,血管生成、血管生成的调节、免疫效应过程、细胞迁移的正调控等过程被显著富集,与观察到的胸腺皮质血管增生及巨噬细胞增多的现象相关联。此外,Toll样受体信号通路、IL-17信号通路、TNF信号通路等被显著性富集,提示这些信号通路在PRRSV的致病及免疫逃避过程中发挥一定作用。经验证,Toll样受体信号通路中TLR8和IRF5表达显著上调,单核/巨噬细胞趋化因子CCL2、CCL3L1、CCL5及其受体CCR1、CCR2、CCR5表达显著上调,提示这些细胞因子可能与胸腺皮质细胞坏死及凋亡、血管增生、巨噬细胞增多等病变过程相关。综上所述,PRRSV感染导致仔猪免疫器官受损,尤以胸腺组织损伤最为严重。转录组学富集到的血管生成、细胞迁移的正调控等生物学过程与胸腺表现出的血管及巨噬细胞增生现象相关联。感染仔猪胸腺组织中单核/巨噬细胞趋化因子的表达水平显著上调,提示这些细胞因子可能参与胸腺病理变化过程,为了解PRRSV感染导致胸腺损伤的分子机制提供一定基础。