胃癌患者黏膜相关恒定T细胞的变化及其临床意义

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背景与目的:免疫治疗是继手术、放化疗以及分子靶向治疗之后的重要治疗手段,近年来日益受到人们的关注。针对肿瘤微环境的研究可探究其对肿瘤发生发展的影响,同时对免疫治疗产生指导作用。作为肿瘤免疫微环境的重要组成部分,黏膜相关恒定T细胞(MAIT细胞)是一种天然样T细胞,目前已被证实与结直肠癌、肺癌、肾癌等肿瘤密切相关,然而其在胃癌免疫微环境中的变化及作用却尚不清楚。本研究借助流式细胞分析、免疫荧光染色等实验技术,通过体外实验明确胃癌患者体内MAIT细胞数量变化与分布特点以及与临床特征的相关性,同时联合生物信息学分析技术,预测胃癌组织内MAIT细胞的相关分子机制及可能的免疫调控靶点,探讨其在胃癌发生发展过程中的意义。方法:通过流式细胞技术检测51例胃癌患者及39例健康对照者外周血内MAIT细胞的数量并比较其差异性;通过免疫荧光技术检测65例胃癌组织和27例胃良性病变组织MAIT细胞的数量及分布情况并比较其差异性。通过生物信息分析技术分析来自TCGA公共数据库的374例胃癌患者表达谱数据,将表达谱数据转化为MAIT细胞相对浸润水平后分析与MAIT细胞相关的免疫治疗靶点分子,并通过加权基因共表达网络分析(WGCNA)联合基因本体论注释(GO)分析MAIT细胞相关分子机制。结果:本研究的流式细胞实验结果表明,早期胃癌及进展期胃癌患者外周血MAIT细胞比例较健康人均有显著减少,早期胃癌及进展期胃癌患者之间无显著差异。多重免疫荧光染色技术实验结果表明,进展期胃癌组织MAIT细胞的数量显著高于胃良性病变组织,早期胃癌患者组织MAIT细胞数量与胃良性病变组织无显著差异。联合分析提示,胃癌患者外周血和癌组织的MAIT细胞数量呈一定负相关趋势,统计学不显著。利用生物学信息技术,我们纳入TCGA来源的胃癌患者基因表达谱数据,通过Immu Cell AI生信工具计算出胃癌组织内MAIT细胞相对浸润水平。通过加权基因共表达网络分析提取与胃癌MAIT细胞浸润水平显著相关的基因模块,对模块内基因进行基因本体论分析,结果富集于黏膜固有免疫应答与细胞因子受体激活通路。同时,作为先天样免疫细胞的负性检查点受体之一,VISTA基因表达与胃癌组织MAIT细胞浸润水平存在显著正相关。结论:早期及进展期胃癌患者外周血MAIT细胞数量较健康人减少,进展期胃癌组织内MAIT细胞数量较胃良性病变组织增多。胃癌组织内MAIT细胞与免疫检查点VISTA基因表达显著正相关,且与黏膜固有免疫过程及细胞因子受体激活通路密切相关。
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