【摘 要】
：
目的:放射性肺炎是限制胸部肿瘤放疗的重要因素,泛素特异性肽酶11（USP11）被认为参与细胞周期调控、DNA损伤修复及炎症反应等多种生物学过程,但其在放射性肺炎中的作用尚不明确。本研究拟探索USP11在放射性肺炎发生中的生物学作用及具体机制,为放射性肺炎的治疗提供新思路和新方法。方法:1.采用小动物精准照射仪照射小鼠全胸20 Gy X射线及生物学辐照仪照射小鼠全身9 Gy X射线,分别建立小鼠全胸
论文部分内容阅读
目的:放射性肺炎是限制胸部肿瘤放疗的重要因素,泛素特异性肽酶11（USP11）被认为参与细胞周期调控、DNA损伤修复及炎症反应等多种生物学过程,但其在放射性肺炎中的作用尚不明确。本研究拟探索USP11在放射性肺炎发生中的生物学作用及具体机制,为放射性肺炎的治疗提供新思路和新方法。方法:1.采用小动物精准照射仪照射小鼠全胸20 Gy X射线及生物学辐照仪照射小鼠全身9 Gy X射线,分别建立小鼠全胸及全身照射的放射性肺炎模型:采用RT-PCR、ELISA、免疫组化染色、电镜、荧光示踪以及AB-PAS染色等实验分别检测电离辐射后USP11基因敲除小鼠（Usp11-/-）及野生型小鼠（Usp11+/+）肺组织中细胞因子、紧密连接及粘液层改变情况,在体内阐明敲除USP11表达对小鼠放射性肺炎发生及屏障破坏的影响;2.采用HE染色、RT-PCR以及ELISA等实验探讨USP11的抑制剂米托蒽醌（MIX）对小鼠放射性肺炎的影响;3.采用多色免疫荧光染色方法分析USP11在肺的各型实质细胞包括肺泡Ⅱ型上皮细胞、血管内皮细胞以及成纤维细胞中的表达,以此推测USP11可能发挥作用的效应细胞;并在鉴定到的效应细胞中验证上、下调USP11表达对细胞因子产生、紧密连接及渗透性改变等的影响;采用共培养的方式阐明电离辐射后USP11是否通过旁分泌方式参与效应细胞调节中性粒细胞趋化性、凋亡从而共同调节放射性肺炎的发生及其向纤维化转变;4.采用蛋白质组学及蛋白质的泛素化修饰组学对USP11在电离辐射后效应细胞的反应进行全景分析并采用Western Blot及Co-IP技术对组学结果进行验证;5.进一步通过TCGA数据库检测USP11潜在的作用靶点,采用免疫荧光及Co-IP实验检测USP11与潜在作用靶点的相互作用关系,并采用Western Blot及RT-PCR探索USP11对潜在作用靶蛋白稳定性的影响以及在炎症反应调节中的作用。结果:1.小鼠经全胸照射20 Gy X射线后2周及3周,肺组织中炎症反应相关细胞因子明显上升,说明小鼠放射性肺炎建模成功。Usp11-/-小鼠血清、肺组织及支气管肺泡灌洗液中细胞因子IL-1β,IL-6,IL-8的表达水平均较野生型小鼠低,并且敲除USP11增加了电离辐射后黏液层的厚度、减轻了小鼠肺血管对荧光示踪剂FITC-dextran（葡聚糖）的渗透性;2.在全身照射9 GyX射线作用下,Usp11-/-小鼠肺组织中IL-8等细胞因子表达水平较野生型小鼠低、保护性黏蛋白分泌增加、紧密连接破坏减轻;3.初步揭示了 USP11的抑制剂MIX能在体内水平降低小鼠血清中IL-1β,IL-6,IL-8的表达进而减轻小鼠的放射性肺炎;4.免疫荧光染色实验结果表明:USP11在小鼠肺血管内皮细胞中高表达,Western Blot实验结果表明:USP11在微血管内皮细胞HMEC-1中具有明显的辐射响应效应;5.体外实验结果表明:下调USP11的表达能减轻电离辐射引起的内皮细胞细胞因子及ROS的产生、降低紧密连接及细胞渗透性的破坏;6.共培养实验结果表明:下调内皮细胞中USP11的表达降低其对中性粒细胞的招募并促进中性粒细胞的凋亡、减轻成纤维细胞的纤维化进程;7.蛋白质组学联合泛素化修饰组学实验结果表明:在内皮细胞中过表达USP11稳定了 USP22、USP33以及OTUD5等多种去泛素化酶,并初步阐明USP11通过稳定OTUD5参与炎症反应的发生;8.在TCGA数据库中发现USP11与促炎转录因子C/EBPβ存在正相关,体内、外实验结果表明:USP11通过去泛素化C/EBPβ蛋白并维持后者的稳定性,进一步发挥促炎作用;9.但USP11与C/EBPβ并不是通过直接结合发挥作用,本课题初步证实OTUD5参与了USP11对C/EBPβ的去泛素化修饰作用。结论:1.USP11在体内、外水平均能促进早期放射性肺损伤的发生与进展;2.USP11在放射性肺炎中的作用机制可能是通过调节去泛素化酶OTUD5稳定促炎转录因子C/EBPβ进而促进放射性肺炎的发生;3.初步揭示了 USP11的抑制剂MIX具有减轻小鼠放射性肺炎的作用。基于以上研究结果,预期本研究相关结论将为靶向USP11-OTUD5-C/EBPβ开发放射性肺损伤新型防治策略提供可靠的理论支撑。
其他文献
目的:本研究回顾性分析并讨论亚厘米肺结节（直径≤10mm）的影像学特征及临床病理特点,为临床医师管理亚厘米肺结节提供一定的参考依据。方法:收集吉林大学中日联谊医院胸外科2020年1月至2022年12月期间经手术治疗且病理明确的亚厘米肺结节患者的一般临床资料（性别、年龄、吸烟史、饮酒史、肿瘤个人或家族史）、影像资料（影像学大小、结节密度、生长位置、影像特征）及病理资料（病理学大小、病理特征）,采用S
研究目的索拉非尼作为多种致癌激酶的抑制剂,用于晚期肝细胞癌（hepatocellular carcinoma,HCC）的一线全身治疗。由于肝癌复杂的发病机理和肿瘤微环境,单一治疗难以缓解癌症的发展进程,临床上索拉非尼对HCC患者的生存获益并不令人满意,因此基于索拉非尼的联合策略已成为肝癌全身系统性治疗的研究热点。在2022更新的肝癌NCCN指南中,肝癌的一线全身治疗方案已增添至6个,其中,阿替利珠
以zSpace为研究对象，对zSpace进行介绍，对zSpace应用于教学的优势进行阐述，并梳理归纳出目前小学科学教学存在的问题。在此基础上，以小学科学教学为例，构建基于zSpace的小学科学探究式教学设计流程，以期为zSpace在教育领域的深入应用提供借鉴。
样条逼近是计算机辅助几何设计（CAGD）和逆向工程等领域中不可或缺的技术。随着几何造型技术和等几何分析的迅猛发展,工业产品中的唯一标准表示—非均匀有理B样条（NURBS）已然不能满足当下的需求。因此,可局部加细样条应运而生。可局部加细样条具有灵活的造型能力和适合于分析的性质,广泛应用于几何建模和工程等领域。目前,对于B样条中全局和局部逼近方法的研究已经较为成熟,但是对于可局部加细样条的局部逼近方法
第一部分急性髓系白血病CD34+干/祖细胞单细胞测序分析及亚群鉴定研究背景:急性髓性白血病（acute myeloid leukemia,AML）是起源于髓系造血干/祖细胞的恶性克隆性疾病,以不同分化阶段受阻的造血祖细胞恶性克隆扩增为特征。AML是一种具有不同血液学表型异质性和分子复杂性的疾病,存在多种免疫表型和遗传学异常,因此,不同患者预后差异很大。AML造血干/祖细胞是发病的根源,并表现出肿瘤
通过透皮给药在黑色素瘤治疗中增强皮肤渗透和促进肿瘤浸润仍然是一个棘手的挑战。本课题制备了一种用于多西紫杉醇（DTX）和1-甲基-色氨酸（1MT）透皮递送的肝素（Hep）功能化氧化石墨烯（GO）制剂。Hep通过酰胺键接枝到GO上来构建Hep功能化-GO（GH）,然后通过π-π堆积负载化疗药物DTX和吲哚胺2,3-双加氧酶（IDO）抑制剂1MT。将DTX和1MT的Hep功能化GO（D-1/GH）包埋在
秀丽隐杆线虫作为一种成功的多细胞模式生物,半个世纪以来被广泛应用于包括发育、衰老、代谢、应激、神经生物学等多个领域的研究。近年来,秀丽线虫已经被开发为细菌、真菌等多种人类病原体微生物发病机制和先天免疫研究的模型。然而,由于自然界感染秀丽线虫的天然病毒种类极少,并且活体线虫几乎对于所有人类致病病毒均不易感,使得线虫模型对病毒学相关的研究贡献一向十分有限。虽然研究者们尝试构建了一些病毒相关的线虫实验模
随着科技的进步,促使了工业迅速的发展,而在工业生产过程中产生的废水对环境造成了污染,特别是存在于废水中的重金属离子,其不可生物降解性,且积累到一定量会对人类健康和生态系统造成危害。因此,对污水中重金属离子的处理成为了人们关注的焦点。对去除污水中的重金属离子的方法有多种,如化学沉降、生物分离、电化学技术、膜技术和吸附等,其中,吸附由于效率高、成本低和没有二次污染等原因,成为了一种具有发展前景的技术。
水资源短缺正逐渐威胁着人类社会的可持续发展,已成为最严峻地全球性挑战之一。太阳能驱动的水纯化技术能利用丰富且绿色的太阳能,直接从海水或者污水中提取干净水。太阳能驱动的水纯化技术具有环境友好、低成本和低能耗等优点,对于缓解水资源短缺,尤其是偏远且不发达地区,具有极大的潜力。太阳能驱动的水纯化技术主要包括界面蒸发和太阳能膜蒸馏（SDMD）。界面蒸发主要依赖于界面蒸发体,具有较高的水汽产生速率,但水汽冷
丝素蛋白具有良好的生物相容性,无明显的免疫原性,可被生物降解,作为组织工程支架具有广阔的开发和应用前景。然而,对于再生丝素三维支架,一方面,在用于皮肤真皮、血管等组织再生时,存在因局部降解太快、产生碎片而造成的三维结构过早塌陷的不足,在用于硬组织修复时,则更需延缓其降解。另一方面,家蚕丝素蛋白材料引导细胞黏附、增殖的活性不及胶原、纤维蛋白等天然蛋白质材料,引导组织再生的能力有待加强,如何防止支架过