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目的:帕金森病（Parkinson’s disease,PD）是仅次于阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease,AD）,位居第二位的常见的神经退行性疾病。PD的特征性的病理改变主要为:一、黑质纹状体系统多巴胺能神经元进行性死亡、缺失,导致抑制性神经递质与兴奋性神经递质失衡,引起一系列症状。二、神经元内α-突触核蛋白（α-synuclein,α-syn）异常聚集导致路易小体（Lewy body,LB）的形成。多巴胺能神经元的病理变化会导致黑质纹状体通路破坏及尾状核、壳核中多巴胺含量减少,通常纹状体70%-80%的多巴胺能神经元和黑质致密部50%的多巴胺能神经元丢失时,临床症状才会出现,例如静止性震颤、肌僵直、运动迟缓、步态异常等,以及一些非运动症状,如自主神经功能紊乱、精神症状、感觉障碍等。由于PD临床症状出现时,已有大量神经元受累,导致早期诊断尤为困难,且目前的治疗手段只能缓解临床症状,无法逆转神经元死亡,因此深入探究PD发病机制,寻找其潜在治疗靶点对早期诊断及阻止PD的发病进程具有重要意义。微小RNA（microRNAs,miRNA）是一类单链小分子非编码RNA,长度约为21-23个核苷酸,具有高度保守性。miRNA参与基因表达起调控作用,能够抑制其靶mRNA的翻译或者促进mRNA的降解。miRNA在病理和生理情况下表达的含量有所差异,往往在疾病早期已出现改变,因此研究miRNA表达改变对疾病的早期诊断具有重要意义。miR-495-3p在各种肿瘤疾病中被广泛研究,被认为通过参与炎症、自噬等通路影响肿瘤的发生与发展。有研究报道miR-495-3p广泛存在于脑组织中,被认为在神经系统的发生发展中起到重要作用。miR-495-3p在PD患者血液样本测序分析时,发现其水平与正常对照组存在差异。且实施脑深部电刺激术（Deep Brain Stimulation,DBS）的患者治疗前后miR-495-3p含量存在明显差异,鉴于其在PD模型中尚未被研究,因此本实验拟从不同PD细胞模型上研究miR-495-3p对PD进展的影响,为今后PD治疗提供新思路。研究方法:本研究采用两种PD细胞膜型,分别为MPP+诱导的人神经母细胞瘤细胞（SH-SY5Y）,及纤维诱导的α-突触核蛋白过表达的人胚肾细胞（HEK293-α-syn-GFP）细胞模型。首先应用CCK8检测细胞活力及显微成像技术确立两种细胞模型构建成功。利用蛋白免疫印迹法（Westen blotting）检测两种细胞模型中凋亡及自噬相关蛋白表达情况。通过实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time Quantitive PCR,RT-q PCR）检测两种细胞模型中miR-495-3p表达水平。随后,通过双荧光素酶报告基因系统（Dual-Luciferase Reporter Assay）验证miR-495-3p可以与SNCA基因mRNA的3‘-UTR区结合。将miR-495-3p模拟物转染至两种细胞模型中,通过蛋白免疫印迹法、免疫荧光法检测α-syn表达情况。通过蛋白免疫印迹法检测凋亡及自噬相关蛋白表达情况。使用外泌体提取试剂盒提取临床样本外泌体,分别通过电子显微镜成像技术、蛋白免疫印迹法、粒径追踪分析法鉴定外泌体,以验证提取物质为外泌体。使用PKH 26对临床样本来源外泌体进行标记染色,与SH-SY5Y细胞体外共培养后观察细胞与外泌体融合情况。使用实时荧光定量聚合酶链式反应检测外泌体样本中miR-495-3p表达情况。最后,将外泌体与SH-SY5Y细胞共培养后检测细胞中miR-495-3p的表达情况及凋亡、自噬相关蛋白表达情况。结果:1、miR-495-3p在MPP+处理的SH-SY5Y细胞模型及纤维处理的HEK293-α-syn-GFP细胞模型中表达均降低（p≤0.05）。2、miR-495-3p过表达可降低MPP+处理的SH-SY5Y细胞中α-syn的水平（p≤0.05）。3、miR-495-3p过表达可抑制纤维处理的HEK293-α-syn-GFP细胞模型中α-syn的聚集（p≤0.05）。4、miR-495-3p过表达可减少MPP+处理的SH-SY5Y细胞凋亡（p≤0.05）。5、miR-495-3p过表达可减轻纤维处理的HEK293-α-syn-GFP细胞自噬的抑制作用（p≤0.05）。6、人血浆来源的外泌体中,PD组miR-495-3p表达较正常对照组减低（p≤0.05）。7、外泌体与SH-SY5Y细胞共培养后,PD组miR-495-3p表达较正常对照组降低,凋亡增加、自噬受抑制（p≤0.05）。结论:1、miR-495-3p可与SNCA基因的mRNA结合,减少α-syn的表达与聚集。2、miR-495-3p通过降低α-syn的表达,增加了SH-SY5Y细胞抗凋亡能力,缓解了HEK293-α-syn-GFP细胞自噬的抑制作用。3、miR-495-3p可通过外泌体运送至SH-SY5Y细胞,并可能影响其凋亡、自噬功能。