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背景：生物钟基因Per2在包括口腔鳞癌的多种癌症中表达异常，并能通过调控细胞增殖和凋亡的改变促进癌症的发生发展。然而，Per2在口腔鳞癌中的调控机制尚不清楚。
目的：本研究从体内外探究生物钟基因Per2在口腔鳞癌中的表达、机制和功能。
方法：用RT-PCR和westernblotting检测正常口腔上皮细胞HOMEC和三株口腔鳞癌细胞株(CAL27、SCC15和TSCCA)中Per2的表达水平；对Per2表达量相对最低的口腔鳞癌细胞株TSCCA行过表达，对Per2表达量相对最高的口腔鳞癌细胞株CAL27行干扰，将不含Per2片段的scramble质粒病毒转染的TSCCA和CAL27细胞作为阴性对照组，无特殊处理的TSCCA和CAL27细胞作为空白组；用westernblotting检测过表达和干扰效率；采用CCK-8和MTT检测TSCCA和CAL27细胞存活率；应用流式细胞术和TUNEL实验检测凋亡；用葡萄糖和乳酸试剂盒分别检测细胞葡萄糖产生和乳酸生成效率；用酶活性检测试剂盒分别检测糖酵解三大关键限速酶(HK、PK和LD)活性；通过westernblotting检测PI3K、AKT、p-AKT、HK2、PKM2和LDHA蛋白表达水平；在Per2过表达的TSCCA细胞中加入AKT激活剂，在Per2沉默的CAL27细胞中加入糖酵解抑制剂，分别进行功能回复实验；运用Per2过表达后的口腔鳞癌细胞行体内成瘤实验，记录体内成瘤的体积、重量及生长速度，用RT-PCR和westernblotting分别检测肿瘤Per2、HK2、PKM2和LDHAmRNA和蛋白表达水平。
结果：与正常口腔上皮细胞HOMEC相比较，CAL27、SCC15和TSCCA中mRNA和蛋白表达均显著降低(P﹤0.05)；在口腔鳞癌细胞中，过表达Per2后TSCCA细胞的增殖、葡萄糖摄取量、乳酸产生量和HK、PK及LD的活性显著降低，凋亡显著升高(P﹤0.05)，与此同时，PI3K、p-AKT、HK2、PKM2和LDHA蛋白表达量显著降低(P﹤0.05)，沉默Per2后CAL27细胞结果与之相反；在过表达Per2的TSCCA细胞中加入AKT激活剂后发现：加入SC79后，糖酵解和增殖显著回复升高，细胞凋亡显著降低(P﹤0.05)；在干扰Per2后的CAL27细胞中加入糖酵解抑制剂后发现：加入2-DG后，细胞增殖显著上升，凋亡显著降低(P﹤0.05)；裸鼠体内成瘤实验结果显示，过表达Per2能抑制口腔鳞癌肿瘤形成。
结论：生物钟基因Per2低表达能通过激活PI3K/AKT信号通路促进细胞糖酵解，糖酵解的改变进而介导细胞增殖和凋亡的改变，从而促进口腔鳞癌的发生与发展。
目的：本研究从体内外探究生物钟基因Per2在口腔鳞癌中的表达、机制和功能。
方法：用RT-PCR和westernblotting检测正常口腔上皮细胞HOMEC和三株口腔鳞癌细胞株(CAL27、SCC15和TSCCA)中Per2的表达水平；对Per2表达量相对最低的口腔鳞癌细胞株TSCCA行过表达，对Per2表达量相对最高的口腔鳞癌细胞株CAL27行干扰，将不含Per2片段的scramble质粒病毒转染的TSCCA和CAL27细胞作为阴性对照组，无特殊处理的TSCCA和CAL27细胞作为空白组；用westernblotting检测过表达和干扰效率；采用CCK-8和MTT检测TSCCA和CAL27细胞存活率；应用流式细胞术和TUNEL实验检测凋亡；用葡萄糖和乳酸试剂盒分别检测细胞葡萄糖产生和乳酸生成效率；用酶活性检测试剂盒分别检测糖酵解三大关键限速酶(HK、PK和LD)活性；通过westernblotting检测PI3K、AKT、p-AKT、HK2、PKM2和LDHA蛋白表达水平；在Per2过表达的TSCCA细胞中加入AKT激活剂，在Per2沉默的CAL27细胞中加入糖酵解抑制剂，分别进行功能回复实验；运用Per2过表达后的口腔鳞癌细胞行体内成瘤实验，记录体内成瘤的体积、重量及生长速度，用RT-PCR和westernblotting分别检测肿瘤Per2、HK2、PKM2和LDHAmRNA和蛋白表达水平。
结果：与正常口腔上皮细胞HOMEC相比较，CAL27、SCC15和TSCCA中mRNA和蛋白表达均显著降低(P﹤0.05)；在口腔鳞癌细胞中，过表达Per2后TSCCA细胞的增殖、葡萄糖摄取量、乳酸产生量和HK、PK及LD的活性显著降低，凋亡显著升高(P﹤0.05)，与此同时，PI3K、p-AKT、HK2、PKM2和LDHA蛋白表达量显著降低(P﹤0.05)，沉默Per2后CAL27细胞结果与之相反；在过表达Per2的TSCCA细胞中加入AKT激活剂后发现：加入SC79后，糖酵解和增殖显著回复升高，细胞凋亡显著降低(P﹤0.05)；在干扰Per2后的CAL27细胞中加入糖酵解抑制剂后发现：加入2-DG后，细胞增殖显著上升，凋亡显著降低(P﹤0.05)；裸鼠体内成瘤实验结果显示，过表达Per2能抑制口腔鳞癌肿瘤形成。
结论：生物钟基因Per2低表达能通过激活PI3K/AKT信号通路促进细胞糖酵解，糖酵解的改变进而介导细胞增殖和凋亡的改变，从而促进口腔鳞癌的发生与发展。