目的:探究釉基质蛋白中优势表达的釉原蛋白、成釉蛋白C端肽、釉成熟蛋白在不同浓度下体外自组装步骤及诱导钙、磷离子矿化的能力。方法:1.釉原蛋白、成釉蛋白C端肽、釉成熟蛋白不同浓度下的自组装:分别取适量的釉基质蛋白储备液（釉原蛋白、成釉蛋白C端肽、釉成熟蛋白）,分别制备终浓度为0.01mg/ml、0.05mg/ml、0.1mg/ml、0.15mg/ml、0.2mg/ml的100ul蛋白液（PH 7.6）。取20μl蛋白溶液滴到铜网多孔碳侧,室温下孵育:1?min、10min。JEOL 1400 Plus透射电镜观察自组装情况。2.釉原蛋白、成釉蛋白C端肽、釉成熟蛋白不同浓度下的体外矿化能力:分别配制浓度梯度为0.01mg/ml、0.05mg/ml、0.1mg/ml、0.15mg/ml、0.2mg/ml的釉原蛋白、成釉蛋白C端肽、釉成熟蛋白溶液。每种蛋白分为11组,实验组1-5分别取10μl 0.01mg/ml、0.05mg/ml、0.1mg/ml、0.15mg/ml、0.2mg/ml蛋白液均匀涂布于细胞爬片表面,室温下孵育后转移至2 ml人工唾液中于37℃恒温培养箱,孵育7天、14天后,分别于各组浓度取出样本并进行SEM、XRD分析,观察矿化产物的表征。实验组6-11分别取10μl 0.01 mg/ml、0.1 mg/ml、0.2 mg/ml蛋白液均匀涂布于细胞爬片表面,室温下孵育后转移至2 ml人工唾液后于37℃恒温培养箱,孵育7天后取出风干后,分别涂布10μl 0.1 mg/ml的其余两种蛋白,继续孵育7天,取出样本并进行SEM、XRD分析,观察矿化产物的表征。结果:1.釉原蛋白、釉成熟蛋白、成釉蛋白C端肽在低浓度（＜0.1mg/ml）时,虽蛋白单体有聚集趋势但均未形成纳米球结构。釉原蛋白、釉成熟蛋白在浓度≥0.1mg/ml时,聚集趋势显著,能形成稳定的纳米球结构,具有典型的自组装过程。成釉蛋白C端肽在浓度≥0.1mg/ml时仅可观察到纳米球结构,未形成更高阶自组装结构。2.低浓度（＜0.1mg/ml）的釉原蛋白、成釉蛋白C端肽、釉成熟蛋白在37°C人工唾液矿化7天后,诱导的晶体均散在分布,高浓度蛋白溶液（≥0.1mg/ml）中诱导出典型的针状晶体束,有进一步聚集趋势的“簇状”晶体。延长矿化时间至14天时,诱导的晶体在长度、直径都有所增加,聚集程度增强。其中0.1mg/ml釉原蛋白、0.1mg/ml成釉蛋白C端肽、0.1mg/ml釉成熟蛋白分别在37°C人工唾液矿化14天后,可诱导出与牙釉质纳米微晶到微米级结构类似的羟基磷灰石晶体。釉原蛋白、成釉蛋白C端肽、釉成熟蛋白相互作用下促进矿化晶体的生长。其中0.1mg/ml釉原蛋白、0.1mg/ml成釉蛋白C端肽、0.1mg/ml釉成熟蛋白相互作用下,可诱导出与牙釉质纳米微晶到微米级结构类似的羟基磷灰石晶体。结论:1.釉基质蛋白的自组装和矿化过程受蛋白浓度影响。釉原蛋白、釉成熟蛋白在浓度≥0.1mg/ml时,形成稳定的纳米球结构,具有典型的自组装过程。成釉蛋白C端肽浓度在0.1-0.2mg/ml时仅形成纳米球结构,为不完整自组装过程。2.高浓度釉基质蛋白溶液（≥0.1mg/ml）诱导出经典针状晶体束。釉原蛋白、成釉蛋白C端肽、釉成熟蛋白相互作用下具有结合钙磷离子成核、促进矿化晶体生长的协同作用。