【摘 要】
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天然多酚作为次生代谢物广泛存在于植物中。天然多酚种类复杂,化学结构多样,这使得它们的分析充满挑战。本文使用定量核磁共振氢谱法(~1H-q NMR),建立了中药肉桂多酚提取物中总酚和总糖含量的测定以及样品中6种多酚成分的定性和定量检测的方法,并拓展了q NMR在复杂中药组分分析中的应用。包括两方面的内容:1.建立了肉桂多酚样品中总酚以及总糖含量的~1H-q NMR分析方法。激光辅助基质解析电离质谱(
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天然多酚作为次生代谢物广泛存在于植物中。天然多酚种类复杂,化学结构多样,这使得它们的分析充满挑战。本文使用定量核磁共振氢谱法(~1H-q NMR),建立了中药肉桂多酚提取物中总酚和总糖含量的测定以及样品中6种多酚成分的定性和定量检测的方法,并拓展了q NMR在复杂中药组分分析中的应用。包括两方面的内容:1.建立了肉桂多酚样品中总酚以及总糖含量的~1H-q NMR分析方法。激光辅助基质解析电离质谱(MALDI-MS)与经典紫外测定分析结果显示,肉桂多酚样品的主要成分包括酚类和糖类,4种样品的总多酚含量在23.98%-31.54%;总糖含量为26.01%-54.49%。在肉桂多酚提取物的~1H-NMR谱中,5.5-9.5 ppm的光谱区域,含有芳香族化合物的共振,是多酚化合物的典型特征区域;糖类物质的出峰区域主要在3.0-5.5ppm处,多酚类化合物和糖类化合物的信号互不干扰,且样品中鉴定的其他物质信号不干扰总糖以及总酚的定量。在此基础上,建立了肉桂多酚样品中总酚以及总糖含量的~1H-q NMR分析方法。总酚的定量选择邻苯二甲酸氢钾为内标,氘代DMSO为溶剂,~1H-NMR谱图中6.2-7.2 ppm区域的信号被统一积分,用来计算总酚含量;总糖的定量选择邻苯二甲酸氢钾为内标,重水为溶剂,~1H-NMR谱中3.1-4.2 ppm区域的信号被统一积分,用来计算总糖含量。通过~1H-q NMR法测定的样品总多酚含量为20.11%-33.70%;总糖含量为21.10%-50.34%)。2.建立了两种肉桂多酚成分的~1H-q NMR定量分析方法。选择邻苯二甲酸氢钾作为内标,脉冲序列选择zg30,方法1(氘代DMSO法)选择NS=256次,使用氘代DMSO作为溶剂,测定了样品中表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)、表儿茶素没食子酸酯(ECG)、表儿茶素(EC)、表没食子儿茶素(EGC)、没食子儿茶素没食子酸酯(GCG)以及没食子酸(GA)6种多酚成分的含量;方法2(重水法)选择NS=512次,使用重水作为溶剂,测定了样品中表儿茶素(EC)、表没食子儿茶素(EGC)、没食子儿茶素没食子酸酯(GCG)3种多酚成分的含量。建立的两种~1H-q NMR方法经方法学验证,结果表明,各组分测定的线性相关系数r在0.999以上,精密度日内RSD<1.08%、日间RSD<1.48%,LOD在0.01-0.14 mg/m L,LOQ在0.07-0.69 mg/m L,加标回收率在98.2%-101.7%范围内。用于样品测定的结果与高效液相色谱法测定结果基本一致。建立的两种方法可实现肉桂多酚样品中6种成分的同时测定,为肉桂多酚样品的鉴别和质量控制提供了新的方法。方法1(氘代DMSO法)还被用于测定三批茶多酚样品中的6种酚类成分。
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