泛素-蛋白水解酶复合体通路又称之为泛素化途径，是生物体内蛋白降解和修饰的主要途径之一。泛素结合酶是泛素-蛋白水解酶复合体通路中的第二个酶，它在泛素转移和底物特异性识别的过程中发挥着及其重要的作用。目前，针对于泛素结合酶的研究主要集中在拟南芥，酵母和哺乳动物（人和小鼠）几种模式生物上。对于昆虫泛素结合酶的研究还不是很广泛，针对于家蚕的泛素结合酶研究更是很少见，本实验室通过荧光差异显示的技术发现了一段核苷酸片段，经过序列比对发现其具有泛素结合酶的典型UBC结构域，故命名为BmUbcE2。因此，本研究通过生物信息学分析、基因的克隆、重组蛋白的原核表达、抗体的制备、亚细胞定位、组织分布以及检测该蛋白在抗BmNPV和易感BmNPV的家蚕品系中病毒感染后表达量差异几个方面对目的基因进行了鉴定，结果如下:　　 ①通过生物信息学的比对发现该片段具有泛素结合酶家族的UBC保守结构域和半胱氨酸活性位点（第111位半胱氨酸）以及泛素结合酶的完整开放阅读框，编码一个183个氨基酸，分子量21KDa的蛋白（预测等电点:6.83）。此外，BmUbcE2定位在家蚕的15号染色体上。多序列比对表明:BmUbcE2与柑橘凤蝶papilioxuthus(GenBank:BAM19931.1)的同源性最高。通过与已经公布的泛素结合酶进行比对，发现BmUbcE2与人的泛素结合酶UBE2L6在蛋白的三维构象上具有高度的相似性。　　 ②为了了解BmUbcE2基因的生物学特性，构建BmUbcE2原核表达载体，在大肠杆菌BL21(DE3)中成功表达了融合6个组氨酸标签的重组蛋白，然后用镍柱纯化表达的蛋白。利用纯化的融合蛋白免疫雄性昆明小鼠制备了多克隆抗体。　　 ③利用该片段的特异性引物和多克隆抗体，在转录和翻译两个水平上检测了BmUbcE2在家蚕不同组织中的分布。RT-PCR和Westernblot实验结果表明:BmUbcE2广泛的分布在家蚕的中肠、丝腺、脂肪体、马氏管、精巢、血淋巴以及蚕蛹中。免疫荧光实验在家蚕细胞的细胞质和细胞核中均检测到了BmUbcE2的存在，这就表明:该蛋白定位与家蚕细胞的整个细胞中。　　 ④在对BmNPV具有高抗性(NB)和易感性(306)以及近等基因系(BC8)的家蚕感体内，验证了感染病毒前后，体内BmUbcE2表达量上的差异。研究表明，三个品种的家蚕中肠感染病毒24小时时，BmUbcE2的表达量都有一定程度的下调，其中NB下调的幅度最大。但该现象在抗性家蚕BC8中并不明显。其具体原因还有待进一步的研究。