WISP-1在胃癌中的表达及其对胃癌细胞生物学功能的影响

来源 :内蒙古医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:modlong
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目的:胃癌(Gastric Cancer,GC)是全球最常见的癌症之一,具有极高的致死率。胃癌的恶性生物学发生是一个复杂的过程。其相关病理分子生物学机制仍需要进一步证实。WISP-1参与多种恶性肿瘤的发生发展过程,而在胃癌中的研究相对较少。本课题主要研究WISP-1在胃癌发生发展过程中的作用。  方法:首先,本研究以收集冰冻胃癌组织样本及胃癌石蜡切片利用Real-time PCR、免疫组化技术对临床胃癌组织中的WISP-1表达进行相应的检测。其次,应用Real-time PCR、RT-PCR及Western blot(WB)方法检测WISP-1在SGC7901、MGC803、BGC823、AGS四株常见胃癌细胞系中的表达水平,以相对高表达WISP-1的胃癌细胞系(BGC823)作为研究对象,通过构建干扰质粒转染至靶细胞系,筛选稳定低表达WISP-1的细胞系,通过细胞生长曲线、平板克隆形成、细胞划痕实验、软琼脂集落形成实验、细胞体外迁移及侵袭实验探究WISP-1对胃癌细胞生长、侵袭、迁移能力的影响。  结果:(1)Real-time PCR及免疫组织化学染色检测显示WISP-1在胃癌组织中的表达显著高于癌旁组织;(2)RT-PCR、Real-time PCR及WB结果证实WISP-1在BGC823细胞中呈高表达水平;(3)应用细胞定位技术确定WISP-1蛋白在BGC823中定位于细胞核及细胞浆。(4)通过对建立的稳定低表达WISP-1的细胞进行研究,揭示WISP-1低表达后显著抑制胃癌细胞的生长、侵袭及迁移能力。  结论:WISP-1通过促进胃癌细胞增殖、侵袭及迁移等恶性生物学行为的发生最终导致胃癌的发生;本研究结果提示WISP-1将可能成为潜在的胃癌早期诊断分子标志物与胃癌治疗靶点。
其他文献
目的:   探讨缓冲过的、未激活的富血小板血浆(Buffered PRP)的培养基是否能够促进脂肪基质干细胞(ADSCs)软骨样分化和增殖。   方法:   分离、培养Wistar大鼠的ADS