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电压门控Kv7/KCNQ/M钾通道广泛分布在中枢神经系统和外周神经系统。Kv7通道在控制细胞膜电位和神经元兴奋性方面发挥着重要作用。神经元兴奋性的改变与癫痫、疼痛和焦虑等多种疾病有关。开发以Kv7通道为靶点的新型通道开放剂对这些疾病具有潜在的治疗作用。研究目的:研究3种新型Kv7钾通道开放剂SCR2682、SCR2673和SCR2692对Kv7通道的调节作用,并评价其抗惊厥、镇痛和抗焦虑作用,为开发新型Kv7钾通道开放剂提供实验依据。研究方法:1、利用全细胞膜片钳技术,评价SCR2682、SCR2673和SCR2692对Kv7.2/7.3通道的激活作用及SCR2682对海马神经元兴奋性的影响。2、利用电刺激制备小鼠惊厥模型,设立对照组、瑞替加滨(RTG)(7 mg/kg)组、SCR2682(0.25,0.5,1和2 mg/kg)组、SCR2682(2 mg/kg)+Kv7通道抑制剂XE991(3mg/kg)组、SCR2673(0.5,1和2 mg/kg)组以及SCR2692(0.5,1,2和4 mg/kg)组,评价三种SCR化合物的抗惊厥作用。3、建立完全弗氏佐剂(CFA)诱导的大鼠炎症痛模型,设立对照组、模型组、RTG(7 mg/kg)组、SCR2682(0.5,1和2 mg/kg)组、SCR2673(0.5,1和2 mg/kg)组和SCR2692(0.5,1,和2 mg/kg)组,测量给药30 min、1 h、2 h以及3 h后大鼠热痛缩足潜伏期以及机械痛缩足阈值,评价三种SCR化合物的镇痛作用。4、在旷场实验中,将实验动物随机分为对照组、RTG(10 mg/kg)组和SCR2682(05,1,2,4和8 mg/kg)组,评价SCR2682对小鼠自发活动能力的影响。5、在埋珠实验和高架十字迷宫实验中,将实验动物随机分为对照组、RTG(10mg/kg)组、SCR2682(0.5,1和2 mg/kg)组和SCR2682(2 mg/kg)+XE991(1 mg/kg)组,记录小鼠的埋珠个数和在开放臂的时间比,评价SCR2682的抗焦虑作用。研究结果:1、全细胞膜片钳的结果表明,SCR2682、SCR2673和SCR2692均能激活Kv7.2/7.3电流,并且SCR2682(1μM)能增加大鼠海马神经元的M电流,抑制海马神经元的兴奋性。2、在小鼠最大电惊厥实验中,对照组的所有小鼠都经历了最大电惊厥发作。与对照组相比,0.25、0.5、1和2 mg/kg SCR2682分别呈现出44.77%、66.67%、88.89%和100%保护作用,显示出剂量依赖性;10 mg/kg RTG有66.67%的保护作用。SCR2682(2 mg/kg)和XE991(3 mg/kg)合用后,仅显示出33.33%的保护作用。0.5、1和2 mg/kg SCR2673分别呈现出50%、66.67%和100%的保护作用。0.5、1、2和4mg/kg SCR2692分别呈现出33.33%、40%、93.33%和100%的保护作用。这表明SCR2682、SCR2673和SCR2692具有抗惊厥作用。3、注射CFA 24小时后,大鼠对机械痛刺激和热痛刺激产生超敏反应。与CFA模型组相比,SCR2682(0.5,1和2 mg/kg)使大鼠机械痛缩足阈值和热痛缩足潜伏期增加,减轻大鼠对机械性刺激和热刺激的痛觉敏感性。SCR2673在1和2 mg/kg浓度下增加大鼠热痛缩足潜伏期。SCR2692在2 mg/kg时增加大鼠热痛缩足潜伏期。作为阳性对照,RTG(7 mg/kg)也增加了大鼠机械痛缩足阈值和热痛缩足潜伏期。这表明SCR2682、SCR2673和SCR2692具有抗炎性痛作用。4、在旷场实验中,RTG(10 mg/kg)和0.5、1、2 mg/kg的SCR2682均不会影响小鼠的自发活动能力,而当SCR2682的浓度增大至4和8 mg/kg时,与对照组相比,小鼠的活动总距离和平均运动速度均降低。5、在小鼠埋珠实验中,SCR2682(0.5,1和2 mg/kg)和RTG(10 mg/kg)均减少了小鼠的埋珠个数,且SCR2682的作用表现出了剂量依赖型。与单独的SCR2682(2 mg/kg)组相比,SCR2682(2 mg/kg)+XE991(1 mg/kg)组小鼠的埋珠个数增加。在高架十字实验中,SCR2682(0.5,1和2 mg/kg)和RTG(10 mg/kg)均增加了小鼠在开放臂的时间比。这表明SCR2682具有抗焦虑作用。研究结论:SCR化合物SCR2682、SCR2673和SCR2692能够激活Kv7.2/7.3通道,并且在动物体内表现出了抗惊厥、抗炎性痛以及抗焦虑作用。