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胰岛素样生长因子-Ⅰ(Insulin-likeGrowthFactor-Ⅰ,IGF-Ⅰ)是胰岛素样生长因子的重要成员,对机体的生长发育、组织修复、营养代谢、细胞凋亡以及细胞分化等方面有重要的生物学作用,是影响动物肌肉、骨骼生长发育的主要因子,但是自然存在的IGF-Ⅰ基因5非编码区核苷酸序列差异是否影响琅琊鸡早期的生长性状,至今未见报道。本试验以山东地方品种琅琊鸡为材料,克隆了此基因片段并采用PCR-RFLP法检测了423只12周龄非同胞琅琊鸡此编码区的多态性。并运用广义线性模型(GLM)方法分析了基因变异与琅琊鸡的血液生化指标、早期生长发育和屠体性状的关系,初步探索了此基因变异对表型性状的影响。结果显示:
1运用PCR法从琅琊鸡血液中克隆了IGF-Ⅰ基因5非编码区部分序列,长621bp,提交Genbank,获登陆号EF488284;运用RFLP方法对其进行遗传多态性研究,该扩增产物经PstⅠ酶切后,出现AA、AB和BB三种基因型,其基因型频率分别是36.88%、49.65%和13.48%;对纯合子进行测序,发现在IGF-Ⅰ基因5端距启动子7.8kb处有A、G转换。经x2检验,琅琊鸡在该位点上处于Hardy-Weinberg平衡状态(x2=1.088,P>0.05)。
2分析琅琊鸡IGF-Ⅰ基因型与血液生化指标的相关性时发现:AA基因型个体的血糖、总胆固醇含量和淀粉酶活性显著高于BB基因型(P<0.05),谷草转氨酶活性、尿酸含量显著高于AB和BB(P<0.05),谷丙转氨酶、碱性磷酸酶、肌酸激酶活性、尿素含量极显著高于AB和BB(P<0.01);甘油三酯含量高于AB(P<0.05)和BB(P<0.01);基因型AB的血清磷、总蛋白和白蛋白含量显著高于AA型(P<0.05),血清钙含量显著高于BB(P<0.05)。表明AA基因型对肌酸激酶等肉用性能相关的生化指标有正向效应,AB基因型对血钙、血磷等蛋用性能相关的生化指标存在正向效应。
3分析琅琊鸡IGF-Ⅰ基因型与体重体尺的相关性时发现:在0~12周龄内,AA基因型对体重生长和体型指数(体重分别与胫长和胸骨长的比)呈显著的正向效应(P<0.05),使鸡的体格朝向体重大、胫骨和胸骨相对短的肉用方向发展;不同基因型琅琊鸡的生长曲线发生交叉,说明不同阶段同一基因型对琅琊鸡的效应不一致。
4分析琅琊鸡IGF-Ⅰ基因型与屠体性状的相关性时发现:AA基因型个体活重、半净膛重和脂肪含量极显著大于BB型(P<0.01);屠体重、全净膛重、腿肌重和胸肌重显著优于AB型和BB型(P<0.05);剪切力(P<0.05)和失水率(P<0.01)也优于BB型。表明AA基因型对琅琊鸡的肌肉产量和品质有正效应。