目的:建立毛鸡骨草种子的高效液相色谱指纹图谱，得到参照图谱，为科学评价和有效鉴别毛鸡骨草种子药材与控制其质量提供新方法。　　方法:采用高效液相色谱法，对比不同提取溶剂、不同提取方法所获得的指纹图谱，选择图谱显示化学成分较多，提取率较高的方法作为提取条件。本文选用合适的色谱柱及检测波长，优选流动相的组成、配比、流速，调节柱温，使色谱符合指纹图谱的要求。在已确定的色谱条件下，考察指纹图谱中相思子碱的分离度和理论塔板数。取同一份样品溶液，重复进样6次，记录保留时间和峰面积作精密度试验。取样品溶液分别于0、2、4、8、12、24小时进样，记录保留时间和峰面积作稳定性试验。取同一批毛鸡骨草种子药材6份，平行制备样品溶夜，进样，记录保留时间和峰面积作重复性试验。选择不同产地的毛鸡骨草种子药材10批，制备供试品溶液，进行指纹图谱分析。使用“计算机辅助相似度评价软件”进行数据处理，对10批毛鸡骨草种子药材进行相似度比较分析。　　结果:样品提取方法，药材加入50％甲醇超声处理，所得图谱峰信息较多，保留时间有较好的稳定性与重现性。色谱条件以迪马Inertsil ODS-3 C18柱(4.6×250mm，5μm)，乙腈-0.1％磷酸为流动相进行梯度洗脱;流速为1.0ml/min，柱温30℃;检测波长为270nm，进样量10μl。在上述色谱条件下，相思子碱的保留时间约为16分钟，与其它色谱峰的分离度大于1.5。精密度试验显示，占5％以上的各共有色谱峰相对保留时间和相对峰面积均无明显变化，其RSD值分别为0.07％～0.26％之间和0.06％～0.72％之间，精密度良好。稳定性试验显示，占5％以上的各共有色谱峰相对保留时间和相对峰面积在24小时内均无明显变化，其RSD值分别为在0.18％～0.46％之间和0.05％～1.14％之间，显示其稳定性良好。重复性试验显示，占5％以上的各共有色谱峰相对保留时间和相对峰面积均无明显变化，其RSD值分别为0.14％～0.30％之间和1.21％～3.22％之间，重复性良好。得到10批毛鸡骨草种子药材的指纹图谱，并生成对照图谱。10批毛鸡骨草种子药材指纹图谱相似度较好，以相似度计算，各批药材间的相似度比较，均在0.9以上。　　结论:本文建立了毛鸡骨草种子药材的HPLC指纹图谱，并得到对照指纹图谱，其检测方法重现性和精密度良好，可用于毛鸡骨草种子药材的鉴别及质量控制。