猪精液冷冻保存技术的初步研究

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本研究的目的是检测不同浓度的添加物对猪精液冷冻效果的影响。本研究共设计了五个试验,分别是检测不同浓度(0.5 g/L,lg/L,1.5 g/L)(w/v)的牛血清白蛋白(BSA)、二甲基乙酰胺(DMA)(0.5%,1%,1.5%)(v/v)、甲基-β-环糊精载胆固醇( CLC)(lg/L,2.5 g/L,5g/L)(w/v)以及不同的解冻温度(37℃,50℃,70℃)对猪精液冷冻效果的影响。通过分别检测冷冻后精子的活率、活力、质膜完整性、顶体完整性、线粒体活性,来评定上面三种添加物以及解冻温度对猪精液冷冻效果的影响。另外,用冷冻保存效果最好的精液和鲜精做体外受精(IVF)对比试验。   结果:显示,试验一:0.5 g/L BSA组的冻后精子活力、质膜完整率、顶体完整率和线粒体活性高于其它组,但无显著差异(P>0.05)。试验二:1%DMA组冷冻后精子活率和活力显著(P<0.05)优于1.5% DMA组;同时,它也高于对照组(3%甘油)冻后精子活率和活力,但差异不显著。试验三:不同浓度CLC组冻后精子的活率、活力、质膜完整性和线粒体活性与对照组相比,差异不显著。试验四:50℃和70℃解冻精子组的活率和线粒体活性显著高于37℃解冻的精子;50℃解冻精子组的活力和质膜完整率显著高于其它两组。试验五:新鲜精液IVF后卵裂率显著高于(P<0.05)冷冻保存的精液的卵裂率,但是二者囊胚率无显著差异。结论是,在猪精液冷冻稀释液中,用DMA可以代替甘油作为渗透性保护剂,以1%DMA浓度且在50℃解冻最佳;冷冻保存的精液和新鲜精液IVF后,囊胚率无显著差异(P>0.05)。
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