牛疱疹病毒1型（Bovine herpesvirus 1,BoHV-1）是一种对世界养牛业造成巨大经济损失的重要病原体,该病毒感染宿主种类较少,其中牛是该病毒最重要的宿主。该病毒感染人的情况尚未见报道,但是BoHV-1可以有效感染并杀死多种人类肿瘤细胞,包括来自肺、乳腺、骨骼及前列腺等肿瘤细胞。目前该病毒在肿瘤细胞中复制的分子机制报道较少,表皮细胞生长因子（epidermal growth-factor receptor,EGFR）与肺癌等多种肿瘤细胞致病性密切相关。目前BoHV-1感染是否与EGFR相互作用,未见报道。鉴于PLCγ1和Akt等EGFR下游分子均参与调节BoHV-1复制过程,本研究提出假设该病毒感染过程与EGFR相互作用,并影响病毒复制和细胞存活。本研究主要利用Western Blots检测BoHV-1感染A549和MDBK细胞过程中,EGFR及PLCγ1、Akt、Erk1/2等信号通路的变化,初步研究EGFR信号及其下游信号分子与BoHV-1复制之间的相互作用关系。结果如下:1.BoHV-1感染A549细胞诱导凋亡标志蛋白Cleaved caspase-3的表达并显著抑制细胞增殖。2.BoHV-1感染A549细胞24 h、36 h和48 h,均显著上调p-EGFR、p-PLCγ1、p-Akt和p-Erk1/2蛋白的水平,同时显著下调EGFR和Akt蛋白相对表达量,而PLCγ1蛋白相对表达量仅在病毒感染48 h显著下降,Erk1/2蛋白相对表达量在36 h和48 h显著下降。3.BoHV-1感染MDBK细胞4 h、8 h、12 h和24 h,均显著上调p-EGFR蛋白相对表达量,而EGFR蛋白相对表达量仅在病毒感染24 h显著下降。4.BoHV-1感染A549细胞,与DMSO对照组比较,10μM Gefitinib处理细胞24 h,病毒滴度没有明显变化,而处理36 h和48 h,病毒滴度分别下降了约1.4和1.7 log,病毒感染细胞0 h、3 h和8 h后,分别加入10μM Gefitinib处理细胞至36 h,病毒滴度均降低约1 log;BoHV-1感染MDBK细胞,与DMSO对照组比较,10μM Gefitinib处理细胞24 h,病毒滴度降低约1 log。病毒感染A549细胞36 h和48 h,U73122抑制病毒复制,病毒滴度分别下降1 log和1.1 log,Ly294002和U0126对病毒复制没有明显影响,但病毒感染MDBK细胞24 h,Ly294002明显抑制病毒复制。5.BoHV-1感染A549细胞,与DMSO对照组比较,10μM Gefitinib处理细胞24 h、36 h和48 h,均显著抑制了p-PLCγ1蛋白的表达,但对p-Akt蛋白的表达没有明显影响。病毒感染A549细胞36 h,U73122明显抑制p-Akt蛋白的表达,而对p-Erk1/2蛋白没有明显影响。综上所述,BoHV-1感染可以诱导A549细胞凋亡并抑制细胞增殖,但却激活了肿瘤发展、细胞增殖和存活相关的信号通路,包括EGFR、Akt和Erk1/2信号,其中EGFR的激活帮助病毒复制,同样该病毒感染MDBK细胞过程中激活的EGFR也有助于病毒复制。在A549细胞中尽管部分PLCγ1的激活受EGFR影响,且部分Akt的激活受PLCγ1调节,但Akt的活性并不受EGFR影响,推测除PLCγ1以外病毒核酸或蛋白能够直接激活Akt。在A549细胞中Akt和Erk1/2信号的激活对病毒复制没有明显影响,但是在MDBK细胞中Akt分子的激活对于病毒复制起重要作用,首次发现该病毒在不同细胞中激活相同的信号分子Akt其生物学意义不尽相同。