长链非编码RNA linc00883在鼻咽癌复发相关细胞株CNE-2SI中的作用

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[目的]  明确linc00883在鼻咽癌复发相关细胞株CNE-2SI中的作用,探索鼻咽癌复发的机制,为寻找鼻咽癌复发的早期诊断和治疗靶点提供依据。  [方法]  1.利用芯片技术对鼻咽癌细胞株CNE-2与鼻咽癌肿瘤干细胞分化亚群(CNE-2SI)的lncRNA表达情况进行了筛查,按照一定的筛选原则结合文献检索及RNAi抑制效果确定了目标lncRNA。  2.细胞增殖能力采用CCK-8方法及CFDA SE荧光染色法检测细胞生长速率、碘化丙啶单染色检测细胞周期。  3.迁移能力的改变通过细胞划痕实验及transwell试验验证。  4.细胞耐药性采用CCK8分别检测紫杉醇、吉西他滨、5-氟尿嘧啶和顺铂的IC50及IC50下的生长速率。  5.致瘤性采用体外单克隆形成实验和裸鼠体内致瘤性实验验证。  6.采用荧光原位杂交的方法检测临床样品鼻咽癌原发患者及复发患者鼻咽癌组织linc00883的表达差异。  [结果]  CNE-2SI与CNE-2芯片结果分析中,结果显示有2946条lncRNAs发生变化,其中表达上调的有1188条,表达下调的有1758条。按照一定的筛选原则包括变化倍数在5倍以上、表达丰度在1000以上及序列长度在200-3000nt之间等,并结合RNAi抑制效果在50%以上,选择linc00883作为研究目标。进一步功能研究中发现,下调linc00883的表达后,可以抑制CNE-2SI细胞的生长、侵袭迁移能力及体内、外致瘤性,而增强了抗肿瘤药物耐药性;而在CNE-2中,干预linc00883后,肿瘤细胞生长及体内致瘤性无明显差异,而增强了侵袭迁移能力及抗肿瘤药物耐药性。  [结论]  Linc00883在鼻咽癌复发相关细胞株CNE-2SI中明显增高。抑制linc00883的表达后,可以抑制CNE-2SI肿瘤细胞的增殖、侵袭迁移,和增强细胞的耐药性。Linc00883可以在鼻咽癌原发与复发组织标本中检测到,提示其可参与鼻咽癌复发的过程,很可能作为诊断鼻咽癌复发的新的标志物。
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