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【目的】用磷脂酰肌醇3-激酶抑制剂(phosphatidylinositol 3- kinase,PI3-K)LY294002[2-(4-吗啉基)-8-苯基-4氢-1-苯并吡喃-4-酮]处理宣威肺癌细胞株XWLC-05,探讨抑制PI3K/Akt信号转导通路对肺癌放疗的增敏作用及其机制。【材料与方法】1.以云南宣威肺腺癌细胞株XWLC-05为研究对象,用含10%胎牛血清的1640培养液常规培养。2.设置照射加药组(4Gy X-ray+Ly294002),Ly294002不同浓度(0、5、10、20、50umol/L)。各组分别处理细胞24h、48h、72h、96h、MTT法检测490nm波长处吸光度A,计算细胞存活率,推出Ly294002对XWLC-05细胞株放射增敏作用的最佳作用时间和浓度。3.细胞克隆实验:设置对照组(1640培养液)与实验组(含50umol/L Ly294002的1640培养液),两组细胞分别培养24h后给于不同剂量X射线照射(0Gy、1Gy、2Gy、4Gy、6Gy、8Gy),14天后计数克隆数(>50个细胞数),计算细胞存活分数,MicrosoftExcel软件勾画剂量-生存率对数曲线图,SPSS软件Constrained NonlinearRegressin统计学方法计算D0、Dq、SF2值和放射增敏比(SER)。4.设置对照组(照射)与实验组(照射加药)。照射剂量分别为(0Gy、1Gy、2Gy、4Gy、6Gy、8Gy),两组分别干预细胞24h,流式细胞术分析细胞周期和凋亡。5.设置空白对照组,加药组(50umol/L Ly294002),单纯放射组(4GyX-ray)和照射加药组(4Gy X-ray +50umol/L Ly294002),各组细胞培养24h,流式细胞术分析细胞周期和凋亡。6.实验数据用SPSS13.0统计软件处理。采用T检验对两组数据均数进行比较,采用方差分析对多组数据间均数进行比较,均数的两两比较用LSD法,以α=0.05为检验标准。【结果】1.50umol/L为Ly294002放射增敏作用的最佳浓度。50umol/L Ly294002对细胞细胞生存率的影响明显高于0、5、10、20umol/L,统计学处理有差异(P<0.05)。2.Ly294002对XWLC-05细胞放射增敏作用缺乏时间依赖性,24H、48H、72H、96H对细胞生存率的影响没有统计学差异(P>0.05)。3.50umol/L Ly294002与细胞作用24h克隆实验结果显示Ly294002对XWLC-05细胞株有放射增敏作用,放射增敏比1.41。4.单用Ly294002对细胞周期及凋亡无影响,Ly294002联合放疗才能影响细胞周期和凋亡,统计学处理有差异(P<0.05)。5.Ly294002对XWLC-05细胞株放射增敏作用可能为阻滞细胞在G2/M期,统计学处理有差异(P<0.05)。对细胞S期及凋亡影响小,统计学处理无差异(P<0.05)。【结论】1.Ly294002对XWLC-05细胞株有放射增敏作用,最佳作用浓度50umol/L,未见明显的时间依赖性。2.Ly294002联合放疗能影响细胞周期和凋亡,而单用Ly294002对细胞无影响。3.Ly294002对XWLC-05细胞株有放射增敏作用机制为阻滞细胞在G2/M期,而对细胞S期及凋亡影响小。