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目的:本研究通过观察实验大鼠服用益肾通痹汤后对其血清中细胞因子IL-1β和TNF-ɑ表达的影响。依次来探讨益肾通痹汤对治疗膝骨性关节炎的机理。
方法:将40只健康雌性SD大鼠喂养1周以使其适应环境,以随机分组的方式分为4组,每组10只。分别是假手术组(A),模型组(B)、对照组(C)和实验组(D)。除假手术组外,其余组大鼠用Hulth改良法进行造模。实验组以3.7ml/kg/d的剂量给予益肾通痹汤,对照组给予170mg/kg/d的剂量给予盐酸氨基葡萄糖,假手术组未接受治疗,模型组按8ml/kg/d的剂量给予0.9%生理盐水。连续干预4周后处死,取大鼠膝关节软骨在光镜下观察各组HE染色的变化。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组大鼠血清中IL-1β和TNF-ɑ。
结果
⑴HE染色光镜观察
假手术组:软骨细胞结构清晰,细胞均匀分布,未观察到分裂增殖和细胞聚集,潮线完整,无血管翳形成。模型组:软骨结构无序,边界不清,软骨细胞数量少,排列明显不规则。细胞簇集现象可见,潮线模糊,多层次或不可见,并且没有形成血管翳。盐酸氨基葡萄糖盐对照组:细胞排列整齐,结构清晰,细胞数量多于模型组。没有明显的细胞簇集现象,潮线完整清晰,没有形成血管翳。益肾通痹汤组:软骨细胞数量多于模型组,排列整齐,少数层次结构混乱,与模型组相比,聚集现象减少,潮线比模型组更清晰,更完整。
⑵模型组IL-1β高于假手术组(P=0.000<0.05),二者具有统计学差异;对比于模型组,盐酸氨基葡萄糖对照组(P=0.013<0.05),表明差异有统计学意义,益肾通痹汤组(P=0.008<0.05),有统计学意义,两种药物对膝骨性关节炎有治疗作用。益肾通痹汤组与盐酸氨基葡萄糖组对比(P=0.921>0.05),无统计学意义,说明二者对膝骨性关节炎的治疗作用无差异。模型组TNF-ɑ含量高于假手术组(P=0.003<0.05),有统计学意义;对比于模型组,盐酸氨基葡萄糖对照组(P=0.016<0.05),差异有统计学意义,益肾通痹汤组(P=0.038<0.05),差异有统计学意义,两种药物对膝骨性关节炎都有治疗作用。益肾通痹汤组与盐酸氨基葡萄糖组对比无统计学差异(P=0.128>0.05),说明二者对骨性关节炎的治疗作用无差异。
结论:益肾通痹汤可显著降低膝骨性关节炎大鼠炎症滑膜组织中IL-1β和TNF-ɑ的表达量,IL-1β和TNF-ɑ的表达量的降低提示益肾通痹汤能有效减轻滑膜炎症及增生,进而保护关节软骨,延缓膝骨性关节炎病程进程。
方法:将40只健康雌性SD大鼠喂养1周以使其适应环境,以随机分组的方式分为4组,每组10只。分别是假手术组(A),模型组(B)、对照组(C)和实验组(D)。除假手术组外,其余组大鼠用Hulth改良法进行造模。实验组以3.7ml/kg/d的剂量给予益肾通痹汤,对照组给予170mg/kg/d的剂量给予盐酸氨基葡萄糖,假手术组未接受治疗,模型组按8ml/kg/d的剂量给予0.9%生理盐水。连续干预4周后处死,取大鼠膝关节软骨在光镜下观察各组HE染色的变化。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组大鼠血清中IL-1β和TNF-ɑ。
结果
⑴HE染色光镜观察
假手术组:软骨细胞结构清晰,细胞均匀分布,未观察到分裂增殖和细胞聚集,潮线完整,无血管翳形成。模型组:软骨结构无序,边界不清,软骨细胞数量少,排列明显不规则。细胞簇集现象可见,潮线模糊,多层次或不可见,并且没有形成血管翳。盐酸氨基葡萄糖盐对照组:细胞排列整齐,结构清晰,细胞数量多于模型组。没有明显的细胞簇集现象,潮线完整清晰,没有形成血管翳。益肾通痹汤组:软骨细胞数量多于模型组,排列整齐,少数层次结构混乱,与模型组相比,聚集现象减少,潮线比模型组更清晰,更完整。
⑵模型组IL-1β高于假手术组(P=0.000<0.05),二者具有统计学差异;对比于模型组,盐酸氨基葡萄糖对照组(P=0.013<0.05),表明差异有统计学意义,益肾通痹汤组(P=0.008<0.05),有统计学意义,两种药物对膝骨性关节炎有治疗作用。益肾通痹汤组与盐酸氨基葡萄糖组对比(P=0.921>0.05),无统计学意义,说明二者对膝骨性关节炎的治疗作用无差异。模型组TNF-ɑ含量高于假手术组(P=0.003<0.05),有统计学意义;对比于模型组,盐酸氨基葡萄糖对照组(P=0.016<0.05),差异有统计学意义,益肾通痹汤组(P=0.038<0.05),差异有统计学意义,两种药物对膝骨性关节炎都有治疗作用。益肾通痹汤组与盐酸氨基葡萄糖组对比无统计学差异(P=0.128>0.05),说明二者对骨性关节炎的治疗作用无差异。
结论:益肾通痹汤可显著降低膝骨性关节炎大鼠炎症滑膜组织中IL-1β和TNF-ɑ的表达量,IL-1β和TNF-ɑ的表达量的降低提示益肾通痹汤能有效减轻滑膜炎症及增生,进而保护关节软骨,延缓膝骨性关节炎病程进程。