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研究背景与目的肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma, HCC)是最常见的恶性肿瘤之一。目前肿瘤的基础研究工作主要集中在肿瘤细胞自身基因突变以及表观遗传学的变化上,而忽略了肿瘤微环境中间质细胞以及其他非细胞成分的作用。然而,肿瘤微环境却为肿瘤细胞的生长提供了必须条件。HCC肿瘤微环境由许多间质细胞组成,这些细胞可以被肿瘤细胞诱导,在其周围产生大量的细胞因子或者可以通过细胞间的直接接触,影响肿瘤细胞的生物学行为。肝星状细胞(hepatic stellate cell, HSC)是肝脏间质的主要成分之一。目前,有研究指出HCC肿瘤微环境中的HSC能够促进肿瘤细胞的增殖与侵袭迁移。激活的HSC可以异常分泌一些细胞因子促进HCC的进展,影响HCC肿瘤细胞的恶性程度,但相关机制仍然不明确。在肿瘤发生发展过程中,细胞凋亡比过度增殖的作用更加重要,而且放化疗以及生物治疗主要是通过诱导肿瘤细胞凋亡实现的。因此本研究旨在探讨HSC在顺铂诱导的HCC细胞凋亡中的作用,及其所依赖的分子机制。方法LX-2细胞对于顺铂诱导HepG2细胞凋亡的影响：利用Transwell共培养体系观察顺铂干预共培养前后HepG2细胞形态的变化；利用CCK-8的方法检测LX-2细胞对HepG2细胞抗凋亡能力的影响；Hoechst33258染色实验和Annexin-V/PI双染分析细胞凋亡的变化；流式细胞仪分析细胞周期的变化。作用机制的初步探讨：实时定量RT-PCR检测Bax、Bcl-2和p53的mRNA表达水平。应用Western blot检测Bax、Bcl-2蛋白表达水平。结果LX-2细胞在顺铂诱导的肝癌HepG2细胞凋亡中起到保护作用,提高了HepG2细胞的抗凋亡能力。RT-PCR显示顺铂上调了p53和促凋亡基因Bax的mRNA表达水平,下调了抑凋亡基因Bcl-2的mRNA表达水平,并将HepG2细胞周期阻滞在G0/G1-S期。LX-2细胞抑制了这种变化。LX-2细胞在顺铂诱导的肝癌HepG2细胞凋亡中的保护作用可能与抑制p53的激活有关。结论综上所述,本研究进一步证实了肝细胞癌微环境中激活的肝星状细胞对于肝癌细胞的影响。验证了肝星状细胞在顺铂诱导的肝癌HepG2细胞凋亡中起到保护作用,而肝星状细胞的这种保护作用是通过抑制肿瘤细胞凋亡来实现的,可能与抑制HepG2细胞p53的激活相关。