论文部分内容阅读
早期断奶是现代养猪业常用的提高生产力的方法之一,但是,由于饲粮和环境的改变,断奶仔猪常常遭受应激从而导致器官损伤和生长性能下降,甚至死亡。由于其在畜禽生产中的弊端,国家已禁止抗生素作为饲料添加剂。白藜芦醇和姜黄素具有显著的抗炎症、抗氧化和菌群调节的功能,具有替代抗生素的潜力。但是,因为姜黄素和白藜芦醇的生物利用度较低,他们在饲料添加剂上的应用受到了一定的限制。此外,姜黄素和白藜芦醇的抗氧化等功能的分子生物学机制尚未清楚,特别是在RNA表观遗传学方面。本试验旨在探究日粮添加白藜芦醇、姜黄素以及二者联用对断奶仔猪肠道结构形态、肠道抗氧化性能、肠道主要菌群结构、肠道炎症等方面的影响,及其与N6-甲基化修饰之间的联系。此外,确定在日粮中联用姜黄素和白藜芦醇是否具有协同作用,以及二者替代抗生素的效果,以及探究姜黄素和白藜芦醇与断奶仔猪肠道m6A水平,及m6A与肠道健康之间的关系。试验一:日粮添加姜黄素和白藜芦醇对断奶仔猪肠道渗透性和抗氧化性能的影响。试验选取180头28日龄杜长大三元杂断奶仔猪(初始体重为7.8±0.6kg),公母各半,随机分为六个组,对照组饲喂基础日粮,其余各组分别在基础日粮中添加:300 mg/kg复合抗生素(159mg/kg喹诺酮+81 mg/kg吉他霉素+60mg/kg的金霉素)(抗生素组,ANT);白藜芦醇和姜黄素各300 mg/kg(高联用组,HRC);白藜芦醇和姜黄素各100 mg/kg(低联用组,LRC);白藜芦醇300 mg/kg(白藜芦醇组,RES);姜黄素300mg/kg(姜黄素组,CUR)。每组十个重复,每个重复三头猪。猪舍环境温度控制在25℃左右,所有仔猪随意采食、饮水,饲养28d。试验结果表明,饲粮添加姜黄素和白藜芦醇可以提高空肠和回肠的绒毛高度(P<0.05)以及腺绒比(P<0.05),降低肠道D-乳酸和二胺氧化酶水平(P<0.05),提高空肠和回肠黏膜的二糖酶活性(P<0.0 5)。饲粮中添加姜黄素和白藜芦醇使得空肠和回肠黏膜的氧化应激水平降低,抗氧化性能提升,表现为MDA水平降低(P<0.05),GSH/GSSG升高(P<0.05),超氧化物歧化酶(SOD)等抗氧化酶活性升高(P<0.05),抗氧化基因的表达量升高。试验二:日粮添加姜黄素和白藜芦醇对断奶仔猪肠道免疫功能和菌群的影响。试验设计同试验一。本研究发现,与CON组相比,各添加剂组肠道黏膜的促炎因子水平降低,抗炎因子水平升高。饲粮添加姜黄素和白藜芦醇显著提高了仔猪肠道和血浆中免疫球蛋白(Ig)的水平(P<0.05),降低了 TLR4的mRNA和蛋白表达量(P<0.05)。白藜芦醇,姜黄素和抗生素会影响肠道内容物的细菌拷贝数,ANT和CUR组的肠道总细菌数量下降(P<0.05),而CUR,HRC和ANT组的大肠杆菌拷贝数下降(P<0.05),HRC和RES组的乳酸菌拷贝数增加(P<0.05)。姜黄素和白藜芦醇还能改变肠道菌群多样性,与对照组相比,RES组肠道菌群多样性增加,CUR和ANT组多样性降低。试验三:饲粮添加姜黄素和白藜芦醇对断奶仔猪肠道紧密连接蛋白和抗氧化HO-1基因的m6A甲基化修饰的影响试验设计同试验一。本研究发现,饲粮添加姜黄素和藜芦醇改变了空肠和回肠中RNA甲基化相关基因的表达,在回肠中,各组的m6A水平较对照组下降(P<0.05)。姜黄素和白藜芦醇降低了紧密连接蛋白和HO-1基因的m6A富集程度(P<0.05)。m6A的富集程度降低,可以使基因的mRNA稳定性升高,因此姜黄素和白藜芦醇可以通过改变这些基因的m6A富集度,进而提高基因的表达水平。与对照组相比,添加剂组的紧密连接蛋白表达水平提高。综上所述,饲粮添加白藜芦醇和姜黄素可以在一定程度上缓解断奶应激导致的仔猪肠道受损,主要表现在改善肠道结构形态,缓解肠道氧化应激,降低炎症水平,改善肠道菌群结构,并降低炎症信号通路的表达等。白藜芦醇和姜黄素可能会通过减少肠道m6A水平,从而调控肠道功能。试验结果表明,各添加剂组均对断奶仔猪的肠道具有保护作用,并以300 mg/kg姜黄素和白藜芦醇联合添加效果最佳。