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目的:多发性骨髓瘤(MM)迄今仍是一种不可治愈的浆细胞恶性克隆性疾病,在血液系统恶性肿瘤中约占10%。MM细胞遗传学异常决定了其临床高度异质性。由于浆细胞增殖活性较低,常规细胞遗传学(CC)方法检测染色体异常有一定的困难,采用高纯度的磁珠分选系统(MACS)结合间期荧光原位杂交(I-FISH)技术可明显提高MM分子细胞遗传学异常检出率。本实验主要研究MM患者1q21扩增、13q14缺失、TP53基因缺失及IgH易位在疾病中的发生率及预后意义。同时分析硼替佐米和反应停针对各种核型异常的疗效。方法:应用CD138单克隆抗体磁珠对患者的骨髓进行分选,然后结合间期荧光原位杂交(I-FISH)技术分别检测58例MM患者异常骨髓瘤细胞中1q21扩增、13q14缺失、TP53基因缺失及IgH易位的发生率。IgH易位阳性的患者进一步采用LSI IGH/CCNDl探针检测t(11;14)(q13;q32),IGH/FGFR3探针检测t(4;14)(p16.3;q32),IGH/MAF探针检测t(14;16) (q32;q23)。结果:58例患者中37例(63.8%)发生1q21的扩增,40例(69%)发生了13q14的缺失,11例(19%)发生了TP53基因的缺失,35例(60.3%)发生了IgH易位。进一步分析显示33例IgH易位患者中18例(54.5%)为t(11;14)(q13;q32),12例(36.4%)为t(4;14)(p16.3;q32),4例(12.1%)为t(14;16)(q32;q23),其中有1例同时伴有t(4;14)(p16.3;q32)和t(14;16)(q32;q23),2例由于标本量不足未检测t(4;14)(p16.3;q32)和t(14;16)(q32;q23)。1q21扩增、13q14缺失和TP53基因缺失与MM死亡率高有密切相关性。伴有t(11;14)(q13;q32)患者的死亡率明显低于其他两种易位。反应停可明显提高TP53基因缺失患者的临床缓解率(P<0.05),硼替佐米可明显提高1q21扩增、13q14缺失和t(11;14)患者的临床缓解率(P<0.05)。结论:1q21扩增、13q14缺失、TP53基因缺失及IgH易位是MM常见的核型异常,1q21扩增、13q14缺失和TP53基因缺失是MM预后不良因子。伴有t(11;14)(q13;q32)易位患者较其他两种易位患者预后较好。反应停可明显改善TP53基因缺失患者的不良预后,硼替佐米可改善1q21扩增和13q14缺失患者的不良预后。目的:1号染色体异常在血液系统恶性肿瘤中较为常见,且是多发性骨髓瘤(MM)最为常见的染色体结构异常,约占49%,与患者的预后密切相关。对于1号染色体异常的研究有助于揭示MM患者疾病的临床进展及预后机制,从而找到相应的治疗手段。本实验利用胞浆轻链免疫荧光结合FISH(cIg-FISH)技术研究MM中1q21扩增和1p12缺失的情况,同时对比cIg-FISH技术和CD138MACS分选结合I-FISH技术的一致性,进一步探讨MM患者1号染色体异常与疾病发展、预后及治疗效果之间的相关性。方法:应用cIg-FISH技术检测48例MM患者1q21扩增和1p12缺失,分析这两种1号染色体的异常与疾病临床特征及生存期的相关性。对比cIg-FISH技术和CD138MACS分选结合I-FISH技术的一致性。结果:1. 1q21扩增:48例患者中26例(54.2%)出现了1q21的扩增,其中红色荧光信号3个10例(38.5%),红色荧光信号≥4个16例(61.5%)。伴有1q21扩增组死亡率明显高于不伴有1q21扩增组(P<0.05),但两组患者性别、年龄、D-S分期、ISS分期、分组无统计学差异(P>0.05)。我们进一步比较分析了出现3个扩增信号和≥4个扩增信号的两组患者,其在D-S分期和死亡率均存在统计学差异(P<0.05),但在性别、分型、年龄、分组和ISS分期中无统计学差异(P>0.05)。2. 1p12缺失:48例患者中14例(29.2%)出现了1p12缺失,但两组患者在性别、年龄、D-S分期、ISS分期、分组、分型和死亡率均无统计学差异(P>0.05)。3. CD138MACS分选结合I-FISH和cIg-FISH比较:我们将同一组患者此次1q21扩增的实验结果与之前的CD138MACS分选结合I-FISH结果比较,两种检测方法所检测的1q21扩增阳性率在统计学上无明显差异(P>0.05)。结论:1号染色体异常是MM常见的核型异常,1q21扩增是MM预后较差的重要指标。1q21拷贝数≥4的患者预后较拷贝数为3的患者更差,说明随着1q21扩增拷贝数的增加,患者预后有越来越差的趋势。因此对初诊患者采用FISH技术检测1号染色体异常,对早期判断预后,指导临床个体化治疗至关重要。同时我们得出cIg-FISH技术和CD138MACS分选结合I-FISH技术一致性良好。目的:几乎所有的多发性骨髓瘤患者均存在遗传学的异常,荧光原位杂交技术(FISH)的应用大大推动了MM细胞遗传学研究的进展。但是,常规FISH只能用特异性的探针检测已知的染色体异常,对涉及多种染色体的复杂异常则不能澄清。M-FISH应用多种荧光素同时标记人类24条染色体制备全套的染色体探针与待测标本中期分裂相进行杂交,从而使每条染色体显示不同的颜色。因此M-FISH在确定染色体数目和结构异常,揭示隐匿易位及识别标记染色体来源方面具有优势。本研究主要探讨多重荧光原位杂交(M-FISH)技术在多发性骨髓瘤(MM)复杂核型异常(CCAs)检测中的价值。方法:对10例常规细胞遗传学(CC)方法检测具有复杂核型的MM患者应用M-FISH技术确定复杂染色体的重排及标记染色体的组成。结果:M-FISH证实了CC显示的29种结构异常,并进一步明确了1p-、6q-、9q-、9q+、+8q+×2、14q+、?14q、der(4)、der(22)、der(1)t(1;?)(q10;?)、der(3)、del(7)的具体来源;同时也发现CC分析没有发现或不能识别的21种异常,其中t(2;15)(q33;q22)、t(6;7)(q23;q34)、t(8;11) (q24;q23)、t(1;14)(q10;q32)和t(X;1)(q26;q25)是新发现的核型异常。这10例均能随访MM患者病例资料中9例已死亡,中位生存期仅为23个月,较公认的MM患者的平均生存期34个月明显缩短。结论:对伴有CCAs的MM患者,M-FISH技术可以明确CC分析中复杂染色体异常,并发现和纠正CC分析中漏检及误检的异常,为MM的染色体异常研究提供了一种重要的方法,已经成为精确染色体核型分析所不可缺少的手段之一。M-FISH对于检测MM的CCAs具有优势,是精确分析染色体核型不可缺少的技术。