自本世纪初有报道称金丝桃素合成酶（Hyp）可以催化大黄素生成金丝桃素以来,该课题一直是生物酶催化研究领域的热点。目前的报道仅限于原核表达系统的构建。本实验同时构建了金丝桃素合成酶的原核表达系统E.coli BL21（DE3）-pET32a-hyp以及真核表达系统毕赤酵母GS115-pPIC9K-hyp,并通过实验得到原核系统表达最佳条件为IPTG浓度0.5mM,诱导温度37℃,诱导时间4h,此时目的蛋白可溶性表达量最高。真核系统表达最佳条件为甲醇浓度1%,诱导温度30℃,诱导时间72h。并最终进行了目的蛋白的催化实验,表明目的蛋白具有催化底物大黄素生成金丝桃素的功能。由金丝桃素介导的光动力疗法（PDT）是最近几十年兴起的一种癌症治疗的新兴手段。紫杉醇作为传统的癌症治疗药物已经应用多年,但抗药性的问题也越来越严重。本实验采用金丝桃素和紫杉醇联合用药,作用乳腺癌细胞系MCF-7和Bcap-37。通过测定细胞存活率,胞内ROS含量,线粒体膜电位变化,凋亡蛋白caspase-3的表达以及解毒相关物质GSH含量,GST活性的变化,实验结果显示:对于MCF-7细胞而言,两种药物在0.1ug/mL及0.5ug/mL浓度联合作用24h后,细胞存活率平均比金丝桃素、紫杉醇单独作用时分别下降20%及40%左右,细胞内的ROS含量分别提高20%及40%,线粒体膜电位分别下降8%及20%,GSH含量以及GST活性分别下降10%及20%左右,凋亡蛋白caspase-3的表达量有所提高;相同的药物处理,对Bcap-37细胞而言,存活率则分别下降了25%及50%,ROS含量分别提高20%及30%,线粒体膜电位分别下降9%及15%,GSH含量及GST活性10%及20%,凋亡蛋白caspase-3的表达量也有提高。因此,我们认为两种药物联合作用时可以对转移性乳腺癌细胞MCF-7以及普通乳腺癌细胞Bcap-37产生更好的杀伤作用。