为了研究具有广谱抗病毒且能够提高机体免疫水平的鸡基因工程制剂,本研究表达了鸡白介素2（IL-2）和鸡干扰素α（IFN-α）融合蛋白,探究了融合蛋白在体外的生物学活性,从而为融合蛋白在临床上的推广和应用提供科学依据。本研究根据GenBank上登录的鸡IL-2（AF000631）和IFN-α（EU937528）天然基因序列,对天然基因序列进行信号肽的预测。在不改变天然基因序列所编码的氨基酸的条件下,利用密码子的简并性,按照大肠杆菌偏爱的密码子进行优化。将优化好的基因序列合成到原核表达载体pET-32a（+）上,转化到E.coli BL21感受态细胞中,使用特异性引物进行鉴定。重组大肠杆菌使用IPTG进行诱导表达,对目的蛋白的表达方式进行分析,同时优化了表达条件。将获取的目的蛋白进行纯化和复性,同时进行了 Western blot鉴定。使用MTT法,验证了重组融合蛋白对鸡外周血淋巴细胞（PBLC）的增殖活性。使用细胞病变抑制法,在鸡成纤维细胞（CEF）上验证了重组融合蛋白对水泡性口炎病毒（VSV）的抗病毒活性。在鸡胚中,验证了重组融合蛋白对禽流感病毒H9N2分离株的抗病毒活性。使用RT-qPCR技术,检测了重组融合蛋白对干扰素刺激基因（ISG）内源性I型干扰素的影响。结果表明,重组融合蛋白rChIL-2-IFN-α表达成功,分子量为55kDa,主要以包涵体形式进行表达。MTT法检测结果表明,重组融合蛋白rChIL-2-IFN-α对PBLC的增殖促进作用高于rChIL-2组和rChIFN-α组。重组融合蛋白rChIL-2-IFN-α在CEF上抗病毒效价为2.94×104 U/mL,具有明显的抗病毒作用。鸡胚抗病毒效果显示,重组融合蛋白显著地抑制禽流感H9N2分离株的感染,并且能够抑制此病毒的复制。RT-qPCR结果显示,重组融合蛋白rChIL-2-IFN-α能够快速激起干扰素下游抗病毒功能基因的转录,并且能够在长时间维持在较高的转录水平,同时,重组融合蛋白能够提高内源性干扰素的转录水平。综上所述,重组融合蛋白rChIL-2-IFN-α通过融合表达的构建策略,具备了促进淋巴细胞增殖和抗病毒的双重生物学活性;同时能够快速提高干扰素刺激基因、内源性IFN-α和内源性IFN-β的转录水平。