论文部分内容阅读
无角牦牛便于管理,减少牛群之间的争斗伤害,避免不必要的经济损失。目前有关牦牛无角性状调控主效基因及机理的研究尚属空白。本研究以无角牦牛和有角牦牛为研究对象,利用分子生物技术克隆牦牛角性状候选基因,并分析候选基因及其MicroRNA的表达量差异,以期筛选影响牦牛无角性状的主效基因,为无角牦牛的培育提供一些理论依据。试验研究结果如下:1.克隆获得牦牛C1H21orf62、RXFP2和OLIG2基因的完整编码区(CDS)。C1H21orf62 CDS区全长为510bp,编码161个氨基酸。C1H21orf62蛋白是一种亲水性蛋白,含有13个潜在的磷酸化位点,无跨膜域和信号肽;RXFP2基因CDS区全长为2213bp,编码737个氨基酸。RXFP2是疏水性蛋白,含有28个潜在的磷酸化位点,RXFP2蛋白1~21位氨基酸存在信号肽,无跨膜域;OLIG2基因CDS区全长为651bp,编码216个氨基酸。OLIG2是一种亲水性蛋白,含有29个潜在的磷酸化位点,但无跨膜域和信号肽。2.通过实时荧光定量PCR方法分析了6个角性状候选基因的表达量,结果表明SYNJ1、FOXL2和GCFC1基因mRNA相对表达量在牦牛无角和有角角基组织中差异不显著;C1H21orf62基因在角基组织中mRNA相对表达量无角极显著高于有角;RXFP2基因在角基组织中mRNA相对表达量无角显著高于有角,说明牦牛无角性状可能与C1H21orf62、RXFP2基因mRNA的转录丰度相关。OLIG2基因仅在无角角基组织中表达,而在有角角基组织不表达,说明牦牛无角性状可能与OLIG2基因的表达相关。3.通过软件预测牦牛OLIG2基因的靶标MicroRNA:bta-miR-302b、bta-miR-302c和bta-miR-302d,并通过实时荧光定量PCR方法分析其表达量,结果表明bta-miR-302b、bta-miR-302c和bta-miR-302d在牦牛无角、有角角基组织中均表达,但是其表达量差异不显著,推测牦牛OLIG2基因在牦牛角基中的表达可能不受bta-miR-302b、bta-miR-302c和bta-miR-302d的调控。