PBAT生物降解地膜中胺类添加剂的色谱分析及对烟草氮代谢的影响研究

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1.建立了超声同时萃取-水解、氯甲酸乙酯(ECF)衍生、液-液萃取结合GC-MS色谱分离鉴定技术对PBAT生物降解地膜中8种不同胺类添加剂进行定性和定量分析的方法。首先以异氰酸酯水解率为评价指标优化其提取-水解过程,结果表明当VHCl:V乙腈=1:2,HCl浓度为3 mol/L,超声时间为60 min,固液比为1:60(g:m L)时,不同类型异氰酸酯均具有较好的水解率(77~104%)。再以相对校正因子作为评价指标,单因素优化获得最佳衍生化条件如下:Na2CO3调节p H,50μLECF做衍生化试剂,乙酸乙酯作提取剂,且V乙酸乙酯:VECF=950:50,衍生-提取时间为5 min,重复衍生-提取两次。在最佳条件下对该方法进行验证,结果表明该方法具有良好的线性(R~2>0.998),较低的检测限(0.0096~0.0282μg/g)和定量限(0.0302~0.0885μg/g),目标分析物的回收率范围在93.9~101.2%之间,日内和日间精密度的RSD分别为1.22~10.24%和1.46~15.09%,且最终产物稳定不易降解。将该方法用于分析来自不同供应商的PBAT生物降解地膜中胺类添加剂,结果表明,测定样品中均含有2,6-二异丙基苯胺(2,6-DIPA)且含量在1000μg/g以上,少部分样品添加了微量己二胺(HDA)、2,6-二氨基甲苯(2,6-TDA),2,4-二氨基甲苯(2,4-TDA)。该方法可用于对生物降解地膜中胺类添加剂的种类和含量进行监测,从而对相关产品进行安全性评价,同时,该方法可为后续新型生物降解地膜的研发与应用提供一定的理论参考。2.以“2叶1心”期K326烟苗为材料,通过外源添加PBAT生物降解地膜中主要胺类添加剂2,6-DIPA的空白、低(1.77μg/m L)、中(17.7μg/m L)、高(88.5μg/m L)4个浓度进行水培试验,探究其对烟苗表型性状、生理指标及氮代谢的影响。结果表明,2,6-DIPA浓度越高,对烟苗表型抑制作用越明显,株高、茎围、最大叶面积、生物量、根系发育等被显著抑制,叶绿素含量显著增加。丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)等抗逆酶活性随2,6-DIPA浓度增大均有不同程度增加,而谷胱甘肽还原酶(GR)活性在2,6-DIPA低浓度时显著增加,高浓度时显著下降。烟苗叶片中生物碱含量随2,6-DIPA浓度增大先降低后升高,多数氨基酸及其类似物在高浓度时显著下调,仅丙氨酸(Ala)、天冬氨酸(Asp)与色胺(Try)表现为显著上调。综上所述,2,6-DIPA可显著抑制烟苗的生长发育,并使叶绿素含量及抗逆酶活性增加,同时影响烟苗对含氮物质的吸收,进而改变其氨基酸与生物碱的合成代谢。
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