枸杞多糖的制备与质量分析

来源 :苏州大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ppaann850729
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
枸杞是中国传统的药食两用功能食品,中国药典收载枸杞子为宁夏枸杞(Lycium barbarum L.)的干燥成熟果实,功能滋补肝肾,益精明目,用于虚劳精亏,腰膝酸痛,眩晕耳鸣,阳萎遗精,内热消渴,血虚萎黄,目昏不明。枸杞多糖是一类结构复杂的糖蛋白缀合物,具有免疫调节、降血糖等功效,是枸杞的重要药效物质之一。由于枸杞多糖结构组成复杂,传统的分离纯化方法低效,而且缺乏专属性的质量分析方法,这些困难限制了对枸杞多糖的功效和作用机制的深入研究。本论文采用中压制备液相色谱系统(MPLC),建立并优化了枸杞多糖的高效在线分离纯化方法,在此基础上建立了枸杞多糖的质量分析方法,并在体外消化道条件下对其代谢过程进行研究,从而为枸杞多糖的产业化开发提供科学参考。以枸杞子药材为原料,首先采用80%醇提除杂、80℃热水浸提法获得枸杞多糖提取液,经10 KDa中空纤维膜超滤浓缩、冻干获得枸杞多糖(LBP)。采用MPLC系统,结合阴离子交换层析柱对LBP进行初步分离,经过工艺参数的考察和优化,确定制备色谱条件为:DEAE-650M离子交换层析柱(柱体积CV,100 m L;内径25 mm);流动相A为40mM Tris-HCl(pH 9.0),流动相B为0.5 M Na Cl-40mM Tris-HCl(pH9.0);检测波长210和280 nm;LBP上样量0.5 g(A相20 m L溶解);流速5 m L/min。先以5 CV流动相A平衡柱子至基线稳定后,开始上样;待流穿液出峰、基线恢复至初始状态后,以流动相B按0-100%线性梯度洗脱10个CV,按峰收集,获得主要的四个色谱峰P1-P4。各流分洗脱液分别用10 KDa中空纤维膜超滤浓缩,再经Sephadex G25(柱体积120 m L)中压色谱柱脱盐,冻干,获得4个目标枸杞多糖组分LBP-1~LBP-4。在上述色谱条件下,离子交换制备色谱对枸杞多糖的分离效率最佳,LBP(6g)经多次上样纯化,获得样品LBP-1(16 mg)、LBP-2(18 mg)、LBP-3(30 mg)、LBP-4(38 mg),其中LBP-2、LBP-3经检测为均一多糖,LBP-1、LBP-4有待进一步纯化。对枸杞多糖LBP-1~LBP-4进行结构测试与质量分析。(1)紫外光谱显示LBP-1~LBP-4在210、280 nm均有吸收,提示其为糖蛋白缀合物;高效阴离子交换色谱法分析单糖组成,结果表明LBP、LBP-1~LBP-4均含有岩藻糖、鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖、葡糖糖、甘露糖等六种单糖,LBP-1~LBP-4中阿拉伯糖与半乳糖含量最高;氨基酸自动分析仪分析结果表明,LBP、LBP-1~LBP-4均含有18种氨基酸,其中羟脯氨酸、谷氨酸相对含量较高。(2)采用高效分子排阻色谱法,选用TSK-GEL G4000PWXL色谱柱建立了枸杞多糖的分子量分析方法,以葡聚糖系列标准品为对照,测得LBP-1~LBP-4的分子量为65.58、63.83、62.67、65.58 KDa。(3)分别采用硫酸苯酚法、咔唑法、BCA法检测枸杞多糖的中性糖、糖醛酸、蛋白质含量,结果显示,LBP、LBP-1~LBP-4的中性糖含量分别为46.45%、64.08%~73.05%;糖醛酸含量分别为36.85%、8.5%~18.0%,蛋白质含量分别为15.10%、7.27%~18.67%。上述分析结果表明,枸杞多糖LBP-1~LBP-4是一组分子量相近的糖蛋白,其中所含蛋白质含量依次增大,可作为质量分析指标性成分进行枸杞多糖的质量控制。在上述研究基础上,本文采用已建立的HPSEC检测方法,对枸杞多糖的体外消化道代谢过程进行探索研究。研究结果表明,LBP在人工胃液中无明显代谢,在人工肠液、大鼠肠道菌群中可发生缓慢代谢,产生小分子量的降解产物;LBP-2在肠道菌群中也有相似代谢现象。这些初步分析结果,可为今后进一步探索枸杞多糖的消化道代谢途径及其机制提供参考。
其他文献
宠物家长们喜欢把相同品种的猫放在一起进行多元化喂养。这个理论坚定地建立在基础常识和对生物尊重的基础上。即使人类可以长时间吃单一品种的早餐,但是这种人群的身体状况要比每周都食用不同早餐的人群健康程度差很多。家里饲养的宠物例如猫和狗也面临着同样情况。美国宠物食品专家指出:喂食多样化的食物不仅避免猫咪厌倦食物,也是帮助猫咪摄取更多的营养来源,包括酶类,氨基酸,抗氧化物,这要比它们食用单一食物要营养
期刊
【背景】慢性阻塞性肺疾病是呼吸系统的一种常见的慢性疾病,可引起一系列并发症,如肺癌、抑郁、心脑血管疾病、骨质疏松、代谢综合征等,以上均可以导致患者本人生活质量极剧下降,并对其家庭造成沉重的经济负担,甚至可能导致失去生活自理能力或死亡。COPD的特征是不完全可逆性和进行性气道阻塞,具体发病机制尚不完全清楚。人附睾蛋白4(HE4)在分子结构上为乳清酸性蛋白(WAP)抑制剂家族成员,在呼吸道上皮细胞中有
随着工业发展规模的不断扩大,化石燃料的开采及应用程度不断增大,且化石燃料生长周期长达上亿年,过度的开采会使得人类在几百年间就要面临化石能源枯竭的问题。除此之外的,化石燃料的燃烧使得地球环境碳元素循环加剧,再加上地球植被破坏等原因,使得CO2等物质在大气环境的积累,进而导致温室效应的加剧,两极冰川融化,海平面上升。故清洁能源的开发和利用显得尤为重要,近年来,水力发电,风力发电,潮汐发电,光伏发电,核
目的:探讨经皮微创后路伤椎经椎弓根椎体内植入硫酸钙人工骨、单侧伤椎置钉结合短节段椎弓根螺钉内固定治疗无脊髓神经损伤的新鲜创伤性胸腰椎骨折临床疗效。方法:回顾性分析2014年3月~2016年3月收治的42例胸腰椎外伤性骨折患者的临床资料,其中男性30例,女性12例,年龄23~58岁,平均38.9岁;致伤原因:高处坠落伤25例,车祸伤11例,重物砸伤6例;损伤节段:T114例,T1212例,L120例
近年来,随着测序技术和组学研究的发展,人们根据肿瘤的基因和蛋白表达特征对肿瘤进行了精确地划分并制定了个性化的治疗方案,同时这也推动了肿瘤新生抗原疫苗的研究。许多的动物肿瘤模型和临床试验都已证明肿瘤新生抗原疫苗的安全性和有效性,它可以诱导机体免疫系统产生特异性抗肿瘤免疫反应,因此肿瘤新生抗原被认为是精准治疗肿瘤的重要靶标。目前已有许多关于准确预测新生抗原的文章发表,同时也有许多的公司通过测序和软件预
为支撑服务国家清洁能源开发利用,推进深部热能(干热岩)开发利用产业化,中国地质调查局组织实施了“干热岩资源调查与勘查试采示范工程”。工程第一阶段(2019—2021年)以实现干热岩试验性发电为目标,在干热岩成因机制、探测、钻探、储层建造、监测、循环连通等方面取得系列进展,成功实现干热岩试验性发电。
期刊
背景SPECT门控核素心肌灌注显像(G-MPI)是冠心病诊断与危险度分层的常用技术方法,应用G-MPI进行冠心病诊断时通常需进行负荷/静息二次显像。目前常用的心脏负荷试验方法包括运动负荷及药物负荷,平板运动负荷试验是最常用的运动负荷试验方法,药物负荷试验按药理作用机理分为扩血管药物负荷(腺苷和双嘧达莫等)以及多巴酚丁胺药物负荷试验。多巴酚丁胺药物负荷试验与运动负荷试验一样,是通过增加患者的心率和血
为了促进幼儿的全面发展,教师应注重培养幼儿的团队协作能力,让幼儿懂得如何和别人合作、交流、沟通,这对于他们今后的学习、生活具有重要的影响。进入小学后,幼儿学习文化科目的时间增多,参与集体活动的时间相对减少。陶行知说:"集体生活是儿童由自我向社会化道路发展的重要推动力,为儿童心理正常发展的必需。"教师须重视幼儿合作意识的培养,帮助大班幼儿完成从幼儿园到小学的过渡,激发与培养幼儿的合作能力。
期刊
目的:探讨二尖瓣双孔成形术治疗小儿二尖瓣前叶脱垂的临床疗效。方法:回顾分析我院111例2003年3月至2018年3月采用双孔成形术治疗小儿二尖瓣前叶脱垂的临床资料,男性56例、女性55例,年龄1月-12岁(23.2±31.9月),体重4.0-29.5(10.3±5.5)千克。按小儿不同年龄范围内LVEF大小不同分为12月龄组。常规于术前运用经胸超声心动图检查,着重关注二尖瓣前叶脱垂
明清时期,中国与海外联系越发密切,海上“倭”与“寇”的猖獗不断给东南海疆带来更多新挑战。自明代中叶,苏松上海、昆山、常熟、崇明等滨海地带冲突频发。嘉靖间,海疆千里告警,一时无地不乱,动乱还自滨海蔓延到苏松内地,引发多重严重后果。鼎革之际,苏松滨海同样是多方政治势力反复争夺的重点。苏松海滨动乱频发亦引发当事对地方防卫体系、社会秩序的关注和建构,苏松士人还将戡乱御敌的经验不断总结,对后世海疆经营形成重