【摘 要】
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目的:探讨不同HP对椎间盘髓核细胞HMGB2表达的影响,初步探讨HMGB2在Wnt/β-Catenin信号传导中的作用。方法:将人髓核细胞（HNPCs）分成三组,A:0.1MPa组,B:1.0MPa组,C:3.0MPa组,在不同HP下加压4h;CCK-8检测加压后3组细胞增殖情况（24h,48h和72h进行检测）;采用实时荧光定量PCR（q RT-PCR）和免疫蛋白印迹（Western-bolt）
【基金项目】
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湖南省卫生健康委员会科研计划课题；
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目的:探讨不同HP对椎间盘髓核细胞HMGB2表达的影响,初步探讨HMGB2在Wnt/β-Catenin信号传导中的作用。方法:将人髓核细胞（HNPCs）分成三组,A:0.1MPa组,B:1.0MPa组,C:3.0MPa组,在不同HP下加压4h;CCK-8检测加压后3组细胞增殖情况（24h,48h和72h进行检测）;采用实时荧光定量PCR（q RT-PCR）和免疫蛋白印迹（Western-bolt）法检测加压后各组细胞HMGB2、LEF-1、COL-II、MMP-13、β-Catenin的m RNA和蛋白表达水平;免疫荧光法检测加压后各组NP细胞HMGB2及COL-II表达情况;结果:1.CCK-8细胞增殖实验结果可见,C组增殖率相对于A组和B组明显低,差异具有统计学意义（P＜0.05）;A组增殖率较B组低,但差异没有统计学意义（P＞0.05）,表明适当的HP可以促进HNPCs增殖升高,而过大的HP则导致HNPCs增殖降低。2.HNPCs在HP下加压后,q RT-PCR及Western-bolt实验证明,与A组相比较,B组的HMGB2 m RNA及蛋白的相对表达量高,差异具有统计学意义（P＜0.05）,C组的HMGB2 m RNA及蛋白的相对表达量低,差异具有统计学意义（P＜0.05）;与B组相比较,C组中HMGB2 m RNA及蛋白的相对表达量低,差异具有统计学意义（P＜0.05）。HP加压后,三组中HMGB2 m RNA表达量分别是（A组:1.058±0.110,B组:1.942±0.333,C组:0.341±0.114）;三组中HMGB2蛋白表达量分别是（A组:0.427±0.056,B组:0.775±0.083,C组:0.150±0.008）;3.不同HP下加压后HMGB2及COL-II免疫荧光单标实验结果可见,B组HMGB2、COL-II蛋白表达最强,C组HMGB2及COL-II蛋白表达最弱。4.Pearson相关性分析结果显示,不同HP加压后,HMGB2与LEF-1、COL-II和β-Catenin m RNA水平三者之间具有相关性,其中HMGB2水平与LEF-1水平呈负相关（r=-0.919,P＜0.05）;HMGB2水平与Col II水平呈正相关（r=0.888,P＜0.05）;HMGB2水平与β-Catenin水平呈负相关（r=-0.938,P＜0.05）;结论:静水压可影响髓核细胞HMGB2的表达,HMGB2与Wnt/β-Catenin信号通路中LEF-1及COL-II等因素有相关性。
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