北沙参多糖的制备工艺及质量控制研究

来源 :河北科技大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:undeadmoon01
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
北沙参为伞形科植物珊瑚菜(Glehnia litoralis F.Schmidt ex Miq.)的干燥根,具有养阴清肺、益胃生津等功效。2015版《中国药典》对北沙参只有外观性状和显微特征的鉴别,未对活性成分及其含量进行规定,因此,在市场中存在和混淆品难以区别,临床使用中药效不稳定等现象,质量控制方法和手段有待进一步完善。本文探究了超声波辅助法提取北沙参多糖的最优工艺,并对北沙参多糖的理化性质及抗氧化活性进行了研究,建立了基于北沙参多糖的多维指纹图谱用于北沙参药材鉴别的方法。主要研究方法和结果如下:(1)优化北沙参多糖的提取工艺:选取产地为河北省安国市的北沙参为研究对象,选择超声波提取时间、提取温度、提取次数、液料比等作为影响因素,以多糖提取率为评价标准,进行单因素考察;在此基础上,采用响应面法对北沙参多糖的提取工艺进行优化,得到北沙参多糖的最优提取工艺为:液料比22:1,提取温度65℃,提取时间22 min,在此条件下北沙参多糖的提取率为12.13%。(2)测定北沙参多糖理化性质及抗氧化活性:选取10组不同产地的北沙参为原材料,以超声波辅助提取最优工艺提取北沙参多糖。对北沙参多糖的提取率、可溶性总糖含量、蛋白质含量、固体形貌、抗氧化(DPPH自由基和羟基自由基清除活性)活性等指标进行测定。结果表明:北沙参多糖的提取率为安徽省亳州市(19.69%)>内蒙古赤峰市(13.56%)>河北省安国市(12.04%)>山东省莱阳市>(10.26%)>辽宁省抚顺市(7.30%),总糖含量为内蒙古赤峰市(91.60%)>山东省莱阳市(86.18%)>安徽省亳州市(80.76%)>辽宁省抚顺市(75.34%)>河北省安国市(69.92%),蛋白质含量为辽宁省抚顺市(7.47%)>安徽省亳州市(5.80%)>山东省莱阳市(4.81%)>河北省安国市(3.09%)>内蒙古赤峰市(1.07%)。热重分析结果表明,北沙参多糖的热分解温度约300℃,较为稳定。体外抗氧化活性结果表明,北沙参多糖均具有清除DPPH自由基和羟基自由基的活性。(3)建立北沙参多糖多维指纹图谱:通过高效液相色谱法(HPLC)、凝胶渗透色谱法(GPC)、核磁共振波谱法(NMR)、傅里叶变换红外光谱法(FT-IR)、紫外-可见光谱法(UV-vis)等,分析10组不同产地北沙参多糖的单糖组成、分子量、糖苷键类型、结构特点等信息。HPLC结果显示均含有6种单糖,分别为甘露糖、半乳糖醛酸、葡萄糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖;GPC结果显示分子量及分布为1.15×10~6-1.21×10~6、4.33×10~5-4.91×10~5、4.04×10~4-4.71×10~4、5.02×10~3-5.83×10~3 Da;~1H-NMR结果显示含有6种端基质子信号;FT-IR结果显示均具有多糖的特征吸收峰,包括:3400、2900、1640、1420、1020、890和830 cm-1;UV-vis结果显示多糖的组成成分含有少量蛋白质。经过数据处理和对比分析,最终建立基于北沙参多糖的HPLC、GPC和~1H-NMR多维指纹图谱。(4)应用北沙参多糖多维指纹图谱鉴别混淆品:通过初步建立的北沙参多糖多维指纹图谱与混淆品川明参、明党参、南沙参分别进行对照分析,比较北沙参及其混淆品的差异性,检验本实验确立的北沙参多维指纹图谱是否具有应用价值。结果表明北沙参多糖HPLC、GPC、~1H-NMR多维指纹图谱具有一定应用价值,可用于鉴别正品和混淆品,同时为北沙参药材及其多糖成分的鉴别和质量控制提供参考方法。
其他文献
多糖与硒结合生成有机化合物硒多糖,具有了有机硒元素与多糖的双重功能,增强硒化多糖的溶解性和吸收与利用,又比无机硒化合物更加安全。通过硝酸法、醋酸法制备硒化米胚多糖,用紫外、红外光谱对硒化米胚多糖结构定性,并对硒化米胚多糖进行动物体外及体内抗氧化实验,测定硒的分布和毒性,证明了硒化米胚多糖具有更强的抗氧化性和安全性。主要研究结果如下:(1)米胚多糖提取、分离及组分分析。采用超声法辅助提取米胚多糖,米
学位
第一部分 脂联素对滤泡辅助性T细胞产生的影响实验目的探讨脂联素(Adiponectin,AD)影响对于滤泡辅助性T细胞(T follicular helper cells,Tfh)产生的影响。实验方法磁珠分选正常人外周血CD4+T细胞,流式细胞术(Fluorescence Activated Cell Sorter,FACS)检测Tfh(CD4+CXCR5+PD-1+)表面脂联素受体 1(Adip
学位
硫化氢(H2S)是继CO和NO之后,生物体内被发现的第三种气体信号分子。近年来,H2S在调控植物的生长发育、气孔运动、侧根形成和植物抗逆性(如干旱、高盐、热激、低温、重金属等)多项生理功能中发挥重要作用。但其在黄瓜耐盐中的生理生化机制尚不清楚。因此,本文以Hoagland营养液水培20 d苗龄的盐敏型黄瓜“春夏秋王”为试材,通过200 m M Na Cl盐溶液以及5~20μM Na HS(H2S的
学位
Sirtuin 1(Sirt1)是一种去乙酰化酶蛋白,是抗衰老治疗的新靶点。先前的研究提示Sirt1在调控成骨细胞骨形成过程中起有重要作用,然而,间充质干细胞(MSC)过表达Sirt1是否具有抗颌骨骨质疏松作用还不清楚。为了研究MSC过表达Sirt1在抗颌骨骨质疏松中的作用,使用我们实验室最近构建的以Prx1基因为启动子,在间充质细胞过表达Sirt1的转基因(Sirt1TG)小鼠模型,首先我们检测
学位
背景:胶质母细胞瘤(glioblastoma,GBM)是最常见的侵袭性脑瘤,恶性程度高(WHOⅣ级)。目前标准治疗方案为手术辅以放化疗,约90%患者在治疗后8个月内经历复发,复发后主要以抗血管生成治疗为主且平均生存不足7个月。手术及辅助治疗后快速复发是其高致死的主因。大量研究表明胶质瘤干细胞(glioma stem cell,GSC)在GBM治疗抵抗及复发中发挥重要功能,定量分析其在肿瘤中的呈现比
学位
目的:研究急性淋巴细胞白血病(ALL)耐药细胞中Bruton酪氨酸激酶(BTK)及P-gp糖蛋白(P-gp)相互作用,并通过调控细胞中BTK及NFκB活性的表达,研究其对ALL细胞生物学的研究,探索BTK-P-gp信号通路在ALL耐药发生中的作用机制。方法:1、ALL耐药细胞株的构建:采用阿霉素(ADR)小剂量浓度递增间歇诱导SUP-B15(Ph+ALL细胞株)和RS4;11(Ph-ALL细胞株)
学位
多囊卵巢综合症(Polycystic ovary syndrome,PCOS)是一种育龄期妇女常见的内分泌紊乱类疾病,根据目前实施的诊断标准和人群调查发现,其发病率为6-21%,约占无排卵性不育症病例的80%。主要特征为稀发排卵或无排卵,高雄激素血症和卵巢多囊样病变,主要临床表现为月经周期不规律,不孕,肥胖,血脂异常,多毛等。但目前临床上PCOS的药物治疗效果不理想,对远期并发症也缺乏合理的防治措
学位
全球有超过5亿人患有不同的肾脏疾病,每年有超过百万人死于慢性肾脏疾病(chronic kidney disease,CKD)及其并发的心脑血管疾病[1]。全球慢性肾脏疾病的发病率每年都在增加,年发病增长速率高达7%以上。慢性肾脏疾病已成为继心脑血管疾病、肿瘤、糖尿病之后严重威胁人类健康的疾病[2]。部分慢性肾衰患者发展至终末期肾病(end-stage renal disease,ESRD)时,需要
学位
非酒精性脂肪肝病(Nonalcoholic Fatty Liver Disease,NAFLD)是指以除酒精和其他明确损肝因素所致的肝细胞内脂肪过度沉积为主要特征的临床病理综合征,是与胰岛素抵抗和遗传易感性密切相关的获得性代谢应激性肝损伤。主要包括从单纯性肝脏脂肪堆积,非酒精性脂肪肝肝炎到肝纤维化、肝硬化一系列临床病理过程,与肥胖、胰岛素抵抗、2型糖尿病等代谢综合征密切相关,现已成为最常见的世界范
学位
目的:本文旨在验证低氧微环境下白介素-17(interleukin-17,IL-17)通过TRAF6-NF-κB、PI3K/Akt信号通路调控人牙周膜成纤维细胞(human periodontal ligament cells,hPDLCs)促破骨分化,促进牙周炎中牙槽骨吸收的具体机制。方法:获取hPDLCs以及小鼠骨髓来源单核细胞(bone marrow-derived monocyte cel
学位