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目的:从姜黄素和白藜芦醇对凋亡相关蛋白表达的影响的角度探讨其对人头颈部肿瘤细胞系增殖和凋亡的影响机制。 方法:用姜黄素联合白藜芦醇联合处理Hep2(人喉癌上皮细胞)和Fadu(人下咽鳞癌细胞),采用MTT(噻唑蓝)比色法检测细胞存活率,平板克隆形成实验检测单个细胞集落形成能力,Hoechst33258染色检测细胞凋亡情况,Westernblot检测Bax和Bcl-2蛋白表达水平,同时应用Real-time PCR法检测Bax和Bcl-2mRNA表达水平。 结果: 1.姜黄素和白藜芦醇可抑制Hep2细胞和Fadu细胞的存活率。 在Hep2细胞和Fadu细胞中,不同浓度的姜黄素和白藜芦醇可使细胞存活率降低,并有剂量效应;当20μM的白藜芦醇与不同浓度姜黄素联合处理时,Hep2细胞和Fadu细胞的存活率显著降低。 2.姜黄素和白藜芦醇可抑制Hep2细胞和Fadu细胞的集落形成。 与空白对照相比,10μM的姜黄素和20μM的白藜芦醇均可抑制Hep2和Fadu细胞集落的形成;10μM姜黄素和20μM白藜芦醇联合处理24小时后,Hep-2细胞和Fadu细胞集落形成率显著降低。 3.姜黄素和白藜芦醇促进Hep2细胞和Fadu细胞的凋亡。 与空白对照相比,10μM的姜黄素和20μM的白藜芦醇均可促进Hep2细胞和Fadu细胞的凋亡;10μM姜黄素和20μM白藜芦醇联合处理细胞24小时后,Hep2细胞和Fadu细胞的凋亡率明显增加。 4.姜黄素和白藜芦醇促进Hep2细胞和Fadu细胞中Bax的表达,抑制Bcl-2的表达。 10μM的姜黄素和20μM白藜芦醇可以促进Hep2细胞和Fadu细胞中促凋亡蛋白Bax的表达,同时下调抗凋亡蛋白Bcl-2的表达;10μM姜黄素和20μM白藜芦醇联合处理后,Bax的蛋白表达水平和mRNA表达水平均显著增加,而Bcl-2的蛋白表达水平和mRNA表达水平均显著降低。 结论:姜黄素与白藜芦醇联合处理可降低Hep2细胞和Fadu细胞的存活率,抑制细胞集落的形成并促进细胞的凋亡。姜黄素与白藜芦醇促进Hep2细胞和Fadu细胞凋亡的作用机制可能与上调Bax和下调Bcl-2的表达有关。