【摘 要】
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目的观察急性髓系白血病（AML）患者化学治疗前后活性氧（ROS）、异柠檬酸脱氢酶2（IDH2）、去乙酰化酶3（SIRT3）动态变化情况,探讨不同AML患者ROS、IDH2、SIRT3水平的差异及其在临床诊断和疗效评价中的应用价值。方法取20例新诊断的且尚未行化学治疗AML（非APL）患者骨髓及外周血标本;取40例已行化学治疗的AML（非APL）患者骨髓及外周血标本;取20例正常人骨髓及外周血标本作
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目的观察急性髓系白血病（AML）患者化学治疗前后活性氧（ROS）、异柠檬酸脱氢酶2（IDH2）、去乙酰化酶3（SIRT3）动态变化情况,探讨不同AML患者ROS、IDH2、SIRT3水平的差异及其在临床诊断和疗效评价中的应用价值。方法取20例新诊断的且尚未行化学治疗AML（非APL）患者骨髓及外周血标本;取40例已行化学治疗的AML（非APL）患者骨髓及外周血标本;取20例正常人骨髓及外周血标本作为对照。分离骨髓单个核细胞后,收集细胞,分别重悬于DCFH-DA以及Mito-Tracker Green工作液中,全程避光,后将染色完成的细胞收集于六孔板中,使用倒置荧光显微镜,观察骨髓单个核细胞及骨髓单个核细胞线粒体中ROS的表达,并使用image J软件进行平均荧光强度的分析。分别按照不同ELISA试剂盒的检测方法,测定外周血中IDH2以及SIRT3的表达。对患者中AML1-ETO融合基因阳性者进行归纳总结,比较不同基因表达组中SIRT3的表达。针对不同患者治疗疗效、治疗疗程、急性髓系白血病的分类、染色体的不同等进行归纳总结,比较不同分组中SIRT3的表达。结果骨髓单个核细胞及其线粒体ROS表达,新诊断组均高于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）;经治组均低于新诊断组,差异有统计学意义（P＜0.05）。对照组、新诊断组、经治组的外周血IDH2表达量分别为（11.00±4.49）、（18.95±5.02）、（14.99±5.07）μg/L;新诊断组高于对照组,差异有统计学意义（P＜0.0001）;经治组低于新诊断组,差异有统计学意义（P＜0.05）。外周血稀释5倍后,SIRT3表达分别为（937.47±155.43）、（590.65±116.19）、（758.76±220.49）ng/L。新诊断组低于对照组,差异有统计学意义（P＜0.0001）;经治组高于新诊断组,差异有统计学意义（P＜0.01）。在经治后AML患者中,融合基因AML1-ETO表达阳性与表达阴性者相比较,SIRT3的表达差异无统计学意义。按照患者治疗疗效不同,经治AML患者中,部分缓解者SIRT3表达略高,但与完全缓解者相比,差异无明显意义。经治患者中完全缓解亚组,根据其治疗疗程的不同进行比较,治疗疗程较长的患者其SIRT3表达略高于治疗疗程短的患者,但差异无明显意义。根据患者危险度不同进行分析比较,新诊断AML患者中,其SIRT3表达未见明显差异;经治AML患者中,其SIRT3表达未见明显差异。按照患者不同急性髓系白血病分型进行分析比较,新诊断AML患者组中及经治AML患者组中,其SIRT3表达未见明显差异。按照患者不同染色体类型进行比较,新诊断AML患者组中及经治AML患者组中,其SIRT3表达未见明显差异。在经治AML患者中,MRD为1x10^-4患者,其SIRT3表达为（655.73±125.57）ng/L;MRD为2x10^-4者,其SIRT3表达为（710.39±157.56）ng/L;MRD为3x10^-4患者,其SIRT3表达为（887.63±278.14）ng/L。其中,MRD为1x10^-4与2x10^-4患者相比较,SIRT3的表达水平无差异（P＞0.05）。MRD为1x10^-4与3x10^-4患者相比较,SIRT3的表达水平有差异（P＜0.05）,MRD为2x10^-4与3x10^-4患者相比较,SIRT3的表达水平有差异（P＜0.05）。结论SIRT3是作为重要蛋白质在细胞线粒体中调节代谢功能,其在急性髓系白血病患者中表达下调,IDH2及ROS表达随之升高。在AML中,SIRT3的异常表达,影响细胞内ROS的水平,可能为急性髓系白血病患者提供新的治疗疗效预测因子。
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