缺氧对小鼠背根神经节神经元上超极化激活的电流I<,h>的影响

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本实验采用全细胞膜片钳技术研究急性分离的小鼠背根神经节(DRG)神经元上Ih电流的生理特性以及缺氧对Ih电流的影响。在电压钳模式下,Ih电流可被细胞外灌流的1mM/L的CsCl完全而可逆性的阻断。在我们所观察的155个DRG神经元中Ih电流的平均表达率为75.5%。而且细胞体积越大,Ih电流的表达率越高。其中,Ih电流在小细胞上的表达率为5.3%(n=19),中等大小的细胞为79.8%(n84),大细胞为94.2%(n=52)。Ih电流的幅度也与细胞的大小呈正比,随着细胞体积的增大而增加。但是,其电流密度与细胞的大小没有相关性。对Ih电流的电压依赖性和时间依赖性激活的研究发现,该电流在超极化时激活且其电流密度随超极化程度的增加而增大,其激活的速度也随着膜电位超极化程度的增加而加快。激活时间常数τ与神经元的大小负相关,也就是说大细胞上的Ih电流的激活速率要比小细胞上的快。在电流钳模式下,我们发现在表达有Ih的DRG神经元上可观察到“去极化下陷”(depolarizingsag)现象,这说明Ih电流的激活可通过使细胞膜去极化而使细胞的兴奋性升高。Ih的翻转电位(Vrev)和最大电导密度(Gh.max-density.)分别是-31.0±4.8mv和0.2-±0.02nS/pF(n=53)。半激活电位(V0.5)和其激活曲线的斜率κ分别为-99.41.1mv和-10.2±0.3mv(n=50)。Ih电流的最大电导密度Gh.max-density与细胞的大小呈负相关,其他参数(V0.5,Vrev,κ)均与细胞大小不相关。根据缺氧对细胞静息膜电位的不同影响,我们将小鼠DRG神经元分为缺氧敏感型和缺氧不敏感型。在缺氧条件下,V0.5和Vrev向超级化方向平移约30mV,而Gh.max-density和κ不受缺氧的影响。本研究的结果显示在不同大小的小鼠DRG神经元上,Ih电流的激活动力学和电压依赖性特征是不同的。对于缺氧敏感型神经元,缺氧通过将Ih的激活电压向超级化的方向平移从而抑制Ih电流。
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