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目的:针对b FGF与FGFR1结合位点制备b FGF单克隆抗体,并初步研究其在体内和体外对Lewis’肺癌的抑制作用及机制。方法:以重组人bFGF皮下多点免疫BALb/c小鼠,取脾脏B淋巴细胞与骨髓瘤细胞SP2/0常规融合,通过间接ELISA和竞争ELISA筛选出能稳定分泌靶向b FGF-FGFR1结合位点的单抗的细胞株;将细胞株注入小鼠腹腔,制备腹水型单抗,并通过Protein G亲和柱进行纯化、SDS-PAGE纯度鉴定;纯化的抗体经竞争ELISA测定其与FGFR1βⅢc的竞争效率、间接ELISA测定相对亲和常数;克隆目的细胞株b FGF抗体Fv区的基因,软件模拟Fv-b FGF结合位点并与b FGF-FGFR1结合位点相比较;利用CCK-8法检测抗体对Lewis’肺癌细胞的增殖抑制效果、transwell实验检测抗体对Lewis’肺癌细胞的迁移抑制效率;建立C57BL/6小鼠Lewis’肺癌的皮下移植瘤模型,瘤周注射b FGF单抗,测量瘤组织大小并观测肿瘤肺部转移情况;通过q-PCR和western blot检测抗体作用后Lewis’肺癌细胞内E-cadherin的表达量变化及胞内信号分子c-src和β-catenin磷酸化水平的变化情况。结果:筛选出了两株能稳定分泌b FGF抗体且能与FGFR1βⅢC竞争结合b FGF的细胞株Mab E12和Mab D9,竞争ELISA测得其IC50分别为1.564μg/m L和1.96μg/m L,选取竞争效果较好的Mab E12为研究对象,间接ELISA测得Mab E12的亲和常数为5.66×108L/mol;Discovery Studio软件模拟抗体Mab E12 Fv区与b FGF的结合显示其结合位点与FGFR1-b FGF的结合位点存在很大的相似性;CCK-8实验结果显示Mab E12对Lewis’肺癌细胞有较好的抑制效果,IC50为41μg/m L;transwell结果表明Mab E12对Lewis’肺癌细胞的迁移能力有抑制效果(p<0.05);动物实验结果显示Mab E12抗体治疗组与对照组瘤组织大小差异不显著(p=0.056)但瘤组织内E-cadherin的表达增加(p<0.05);Mab E12通过剂量依赖性方式促进E-cadherin的表达(p<0.05),提高c-src、β-catenin的磷酸化水平。结论:成功筛选到了两株能稳定分泌针对bFGF与FGFR1结合位点的单抗的细胞株,其中一株抗体Mab E12在体外能抑制Lewis’肺癌细胞的迁移并提高Lewis’肺癌细胞中E-cadherin的表达量,这一过程主要是通过提高c-src和β-catenin的磷酸化的水平来实现的。