分离自芒果叶片上的内生菌MG-3能够抑制导致龙眼采后腐败的病原菌龙眼焦腐病菌[Lasiodiplodia theobromae(Pat.)Griff.&Maubl.],经鉴定后确定其为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)。本研究首先通过分子生物学方法对菌种进行鉴定,然后研究了该菌株的生物学特性、发酵产生的抑菌物质的分离纯化和理化特性及其保鲜机理。主要研究结果如下:(1)生防菌内生菌MG-3菌体分离自芒果树的叶片和茎的组织。菌体呈杆状、表面粗糙不透明、边缘不整齐、革兰氏显色反应为阳性、芽孢呈椭圆形。该菌的16s rDNA序列与解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens(JQ308585))具有最高同源性达99%。从DNA扩增的角度说明,内生菌MG-3为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliouefaciens)。且该菌的接触酶反应,厌氧生长试验,V-P测定,硝酸盐还原试验,氧化酶试验,淀粉水解试验,明胶液化试验,2%-7%耐盐性试验,pH6.8以及pH5.7营养肉汤试验,30℃、40℃、50℃生长温度试验,酪素水解试验等以上试验结果均为阳性;糖醇类发酵试验、苯丙氨酸脱氨酶试验、10%耐盐性试验、卵磷脂酶试验、吲哚试验、酪氨酸水解试验、60℃生长温度试验、丙酸盐利用试验等试验的结果均为阴性。查《伯杰细菌鉴定手册》以及《常见系统鉴定手册》,MG-3与解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)最相符合。(2)先通过单因素的变化研究不同单因素条件对生防菌内生菌MG-3(解淀粉芽孢杆菌MG-3)发酵液抑菌效果的影响,然后在单因素试验的基础上设计正交试验以确定内生菌MG-3发酵液抑菌效果的最优培养条件。结果表明,内生菌MG-3发酵液抑菌效果最佳的培养条件为:以浓度为3%的玉米粉为碳源、以浓度为3‰的乙酸铵为氮源、培养温度为32℃、通气量为150 mL锥形瓶装入100 mL培养基、接种量为3%、培养基起始pH为7.5。在此条件下其发酵液的抑菌率可达到81.63%。(3)首先运用硫酸铵沉淀法分离得到抑菌物质,然后用大孔树脂吸附将抑菌物质与小分子物质进行分离,得到进一步纯化的抑菌物质,之后用活性炭去除抑菌物质中的色素类物质,最后用葡聚糖凝胶对抑菌物质进行分离纯化,得到较高纯度的抑菌物质,此时杂质类物质已基本去除,纯化后的抑菌物质抑菌率可达到65.47%。(4)以纯化后的抑菌物质为研究对象,研究其理化特性。实验结果表明,生防菌内生菌MG-3(解淀粉芽孢杆菌MG-3)抑菌物质在100℃条件下加热3 min～20 min、pH值范围为2.0～12.0、紫外灯照射时间为10 min～60 min时,抑菌物质的抑菌活性基本未受到影响。在蛋白酶K和胰蛋白酶溶液中5小时后,抑菌物质的抑菌率只有略微下降。解淀粉芽孢杆菌MG-3抑菌物质的抑菌机理为,导致病原菌生长畸形,生成膨大的囊泡状结构,无法正常生长繁殖。