【摘 要】
：
目的巨趾是一种发生在足部罕见的先天性过度生长畸形,脂肪组织过度增生为其最显著的病变特征,但其为非肿瘤样无限过度增生。巨趾发病的分子机制尚不明确,本实验拟以巨趾过度增生的病变脂肪组织为研究对象,研究该疾病发生的潜在分子机制,以期为巨趾的防治及靶向治疗提供依据。方法1.Sanger DNA测序检测病变脂肪组织中基因突变情况。2.Western blot检测病变脂肪组织中PI3K/AKT/mTOR信号通
论文部分内容阅读
目的巨趾是一种发生在足部罕见的先天性过度生长畸形,脂肪组织过度增生为其最显著的病变特征,但其为非肿瘤样无限过度增生。巨趾发病的分子机制尚不明确,本实验拟以巨趾过度增生的病变脂肪组织为研究对象,研究该疾病发生的潜在分子机制,以期为巨趾的防治及靶向治疗提供依据。方法1.Sanger DNA测序检测病变脂肪组织中基因突变情况。2.Western blot检测病变脂肪组织中PI3K/AKT/mTOR信号通路相关蛋白表达情况。Western blot,IHC及IF检测病变组织中HIF-1α表达情况。3.从病变脂肪组织中分离培养脂肪干细胞,采用Western blot在细胞水平检测PI3K/AKT/mTOR信号通路相关蛋白及HIF-1α表达情况。通过LY294002干预信号通路上游PI3K,研究PI3K/AKT/mTOR信号通路对下游HIF-1α表达的调节情况。4.对病变脂肪干细胞进行三系分化诱导,研究病变脂肪干细胞分化能力并通过qPCR检测细胞在分化过程中相关基因的表达变化情况。5.分别通过YC-1抑制及DMOG促进HIF-1α的表达,研究HIF-1α在病变脂肪干细胞分化过程中的作用。6.通过PDX（Patient-derived xenograft）动物模型,将病变脂肪组织移植到裸鼠皮下,通过BYL-719灌胃,在体内研究PI3K/AKT/mTOR信号通路在过度增生脂肪组织中的作用。结果1.巨趾病变脂肪组织内PIK3CA基因发生嵌合突变,主要突变位点为c.3140 A>G（p.His1047Arg）。2.病变脂肪组织中PI3K/AKT/mTOR信号通路关键分子AKT,mTOR蛋白表达升高,HIF-1α表达升高。3.病变脂肪干细胞内PI3K/AKT/mTOR信号通路关键分子AKT,mTOR蛋白表达升高,HIF-1α表达升高。4.LY294002抑制PI3K后,信号通路下游分子HIF-1α表达降低。5.病变脂肪干细胞成脂,成骨,成软骨分化能力降低,通过调节细胞内HIF-1α的表达水平可以改变细胞的分化能力。6.BYL-719在体内可以抑制病变脂肪组织内PI3K/AKT/mTOR信号通路关键分子AKT,mTOR蛋白的表达,使病变脂肪组织体积减小。结论巨趾病变脂肪组织发生PIK3CA基因嵌合突变,激活PI3K/AKT/mTOR信号通路导致脂肪组织过度增生,同时该信号通路调节下游效应分子HIF-1α的表达来控制脂肪组织过度生长的程度,使其非肿瘤样无限增殖,该机制可能是巨趾发生的潜在分子机制。
其他文献
第一部分儿童COVID-19:一项来自中国西部的病例系列研究目的:研究儿童 COVID-19（Coronavirus Disease 2019,2019 冠状病毒病,或新冠肺炎）病例的临床特征和SARS-CoV-2核酸检测阳性持续时间,为临床诊疗和制订合理隔离时间提供依据。方法:采用多中心,回顾性病例系列研究设计,从中国西部四省的7所COVID-19定点医院收集病例资料和随访资料。提取流行病接触史
第一部分婴幼儿时期不同剂量LPS预处理对哮喘模型的影响目的:研究不同剂量脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）及暴露时间窗对哮喘模型的影响。方法:在生后第3天或2周开始给予Balb/c小鼠PBS、1ug或100ug LPS连续滴鼻10天,在第6周建立OVA哮喘模型,检测小鼠气道高反应性、肺组织病理、支气管肺泡灌洗液（BALF）中细胞总数及细胞分类计数,同时检测Treg、Th1、Th
目的:明确围产期母代肥胖环境是否诱导子代小鼠出生后早期下丘脑ER应激,及其对摄食环路发育、摄食调控功能及代谢表型的影响,并探讨母代肥胖环境诱导子代小鼠下丘脑ER应激可能的分子机制。方法:体内研究以ICR小鼠为背景,用低脂（low fat diet,LFD）或高脂高糖（high-fat high sucrose,HFHS）饮食分别喂养5周龄雌鼠5周,通过检测每周体重变化判定HFHS组雌鼠体重增幅,随
目的:苯并芘（Benzopyrene,B（a）P）是多环芳烃类的代表性化合物,属于内分泌干扰物,具有卵巢毒性。课题组前期实验结果显示,B（a）P会影响妊娠早期胚胎植入及蜕膜化过程,而这些过程都受到卵巢颗粒细胞合成与分泌雌激素及孕激素的调控。但目前关于B（a）P对妊娠早期卵巢毒性的机制还知之甚少。本研究探索了B（a）P对妊娠早期卵巢功能的影响及其具体的毒性机制。方法:1、建立B（a）P染毒孕鼠模型:
研究背景:高龄妊娠（AMA）是指分娩时年龄达到或超过35岁。我国高龄妊娠的数量及占比逐年攀升,由此带来的子痫前期（PE）、妊娠期糖尿病（GDM）、早产（PTB）以及死胎等相关并发症的风险也随之升高,伴随的母体远/近期健康及围产儿不良结局相关问题日益凸显。目前,诸多文献已证实母体高龄是导致不良妊娠结局的独立风险因素,但深入探讨其基础病因机制的研究却较为匮乏。AMA胎盘所呈现的血管灌注不良、绒毛成熟障
不良妊娠结局（Adverse Pregnancy Outcome,APO）泛指所有围产期不良环境、遗传等因素对妊娠母体、胎儿造成的异常结果。主要包括宫内发育迟缓、流产、胎儿生长受限等各种出生缺陷类型。妊娠前及妊娠期,为满足胎儿迅速的生长发育需求,以及维持妊娠母体自身活跃的代谢,妊娠期妇女对营养素要求增多。维生素是维持生命的一类微量物质,俗称维他命,以“生物活性物质”的形式参与维持和调控机体的多种生
目的:胚胎着床是生殖的关键步骤,决定妊娠成功与否,研究其机制将有助于解决诸多问题,如不孕症诊断和治疗、提高辅助生殖成功率以及寻求新生殖调控手段等。环状RNA（circular RNA,circRNA）是一类新发现的呈共价闭合环状的内源性非编码RNA（non-coding RNA,ncRNA）。作为竞争性内源RNA（competing endogenous RNA,ce RNA）,circRNA可以
背景:妊娠期糖尿病（Gestational diabetes mellitus,GDM）是妊娠期最常见的代谢异常,越来越多的证据表明GDM会给女性及其后代带来短期甚至长期的严重健康风险。中性粒细胞胞外诱捕网（Neutrophil extracellular traps,NETs）是中性粒细胞诱捕和杀死入侵性病原体的一种新手段,但是NETs形成的过度和失调会参与到多种炎症性疾病的病理过程。糖尿病患者
研究背景及目的:慢性肾脏病（Chronic Kidney Disease,CKD）是世界范围内的公共健康问题,给全球带来了严重的经济负担。心血管疾病（Cardiovascular diseases,CVD）是CKD患者最常见的并发症和主要的死因,且随着疾病的进展,心血管事件的发生率和死亡率进一步增加。在CKD中血管钙化极其常见,据报道,血管钙化是CKD患者CVD发生和死亡的独立危险因素,但CKD血
目的近年来,肥胖的流行率在世界范围内急剧上升。临床发现肥胖孕妇出现不良妊娠结局的风险较高,且可通过影响卵巢功能损伤女性生育能力。随着肥胖的发病率逐年增加,研究肥胖所致的卵巢功能不全具有重要意义。妊娠早期,卵巢黄体主要发挥分泌激素的功能,这一功能是维持妊娠的重要基础。肥胖是否影响了妊娠早期卵巢功能,值得进一步研究。目前,从妊娠早期探讨肥胖对卵巢黄体功能影响的研究尚少。此外,妊娠黄体形成,细胞增殖分化