研究抗菌肽LL-37通过促进阴道上皮细胞免疫因子的分泌抑制假丝酵母菌的作用。
方法（1）构建LL-37原核表达载体pET-Duet/LL-37并在大肠埃希菌M15中诱导表达。对所表达的LL-37融合蛋白进行纯化及鉴定，并用K-B纸片法初步验证LL-37纯化蛋白的抗真菌活性。（2）纯化的LL-37蛋白加入到与假丝酵母菌共培养的人阴道上皮细胞[即外阴阴道假丝酵母菌病（VVC）阴道上皮细胞模型]中，并分为实验组与对照组（不加LL-37纯化蛋白），采用葡萄糖消耗法观察抑菌效果[以吸光度（A）值表示]。采用ELISA方法检测不同时间点干扰素γ（IFN-γ）、白细胞介素10 (IL-10）水平及IFN-γ/IL-10比值的变化。
结果（1）诱导表达的LL-37融合蛋白的浓度为433.92 μg/ml，纯度达96%。K-B纸片法初步证实了LL-37纯化蛋白具有一定的抗真菌活性。（2) LL-37重组蛋白可明显抑制假丝酵母菌生长，实验组各时间点A值明显高于对照组（分别为：12 h ：3.008±0.003、2.967±0.003 ；24 h: 2.941±0.003、2.601±0.003; 48 h: 2.893±0.004、2.409±0.003 )，分别比较，差异均有统计学意义（P< 0.01），并且随时间进展的下降趋势较对照组缓慢。两组IFN-γ、IL-10分泌水平均呈现先升后降的趋势，于24 h达高峰［实验组分别为：（104.00±1.07）、（108.4±0.7）pg/ml；对照组分别为：（85.17±0.28）、（151.6±0.6）pg/ml ]。各时间点比较，实验组IFN-γ水平于24 h时明显高于对照组（P<0.01）；各时间点的IL-10水平均低于对照组（P<0.01），且IFN-γ/IL-10比值均高于对照组（P<0.01）。
结论（1）LL-37重组蛋白对假丝酵母菌具有明显的抑制作用。（2) LL-37重组蛋白通过影响IFN-γ、IL-10等免疫因子的分泌，调整阴道上皮细胞局部免疫，增强抵抗假丝酵母菌感染的能力。