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种群密度是种群的基本特征，常用来调查种群密度有：样方法、标志重捕法、用血球计数板抽样检测法、稀释涂布平板法等。种群密度的调查及误差分析是高中生物教学的重点和难点，近几年的高考中经常有针对种群密度调查方法的考查，下面就通过不同调查方法的分析比较，以提高学生在解决实际问题的能力。
一、样方法与血球计数板抽样检测法的比较
1样方法
样方法是在被调查种群的生活环境内，随机选取若干个样方，通过计数每一个样方内的个体数，求得每个样方的种群密度，以所有样方种群密度的平均值作为该种群的种群密度。
（1）适合对象：植物和活动范围比较小的动物）（如昆虫的卵的密度等）
（2）常用方法：样方形状可以多样，但取样的关键要保证随机性和代表性，常见的取样方法有五点取样法（图A）和等距离取样法（图B）。
2血球计数板计数法
（1）适合对象：指针对细胞悬液中细胞数量的计数，常用于个体较大的细胞或菌体（如人体血细胞、酵母菌等），不适合于普通的细菌（如大肠杆菌）和病毒。
（2）种类：它的规格有两种，一种叫希利格式（16×25型）（如图D），另一种叫汤麦式（25×16型）（如图E）所示。
（3）计算公式：每毫升培养液中酵母菌细胞的计算公式为：
酵母细胞个数/mL=所数小方格中细胞总数×400×104×b所数的小方格数（a）
3两种方法的比较
图汤麦式（如图E）这种计数方法的实质就是五点取样法。
【例1】蓝澡是湖泊中常见的藻类，在调查环境因素对藻类生长的影响时，需要每天定时对藻类进行取样计数。
（1）取出的样液中需立即加入固定液，其目的是。
（2）在计数前通常需要将样液稀释，这是因为。
（3）将样液稀释100倍，采用血球计数板（规格为1mm×1mm×0.1mm）计数，观察到的计数室中细胞分布图见下图，则培养液中藻细胞的密度是个/mL。
参考答案：
（1）维持藻细胞数目不变
（2）藻细胞密度过大
（3）1×108
任何地方只要你爱它，它就是你的世界。
我坚信，人应该有力量，揪着自己的头发把自己从泥地里拔起来。
二、标志重捕法与血球计数板抽样检测法的比较及误差分析
1标志重捕法
在一个有比较明确界限的区域内，捕捉一定数量的动物个体进行标志，然后放回，经过一个适当时期（标志个体与未标志个体重新充分混合分布）后，再进行重捕。根据重捕样本中标志者的比例，估计该区域的种群总数，可计算出某种动物的种群密度。
（1）计算公式
m/M=n/N（区域内动物的数量为M，捕获并标记（数量为m），重捕计数（捕获N、标记n）
分析：n/N即为重捕中标志的个体占所捕到的总个体的比例，m/M即为区域内标志的个体占所有个体的比例。其核心是抓住等式两边的比例相等，从而求出M=m·N/n，标志重捕法的前提是，标志个体与未标志个体在重捕时被捕的概率相等。
但对于此等式中，m、N都是一个定值，每次重捕时，主是要n带来的误差。
（2）误差分析
①M值偏小的情况：标记物过于醒目，（易于被人为捕捉到）所以每次重捕时n值偏大，所以计算出的M值偏小。
②M值偏大的情况：a标记物易脱落，所以每次重捕时n值偏小，所以计算出的M值偏大。b在实际捕捉的过程，如田鼠在被捕捉过一次后更难捕捉，所以重捕时，n值偏小，M值就偏大。c标记物过于醒目，（易于被生活环境中的天敌发现而捕食），则n值偏小，M值就偏大
【例2】某科技小组在调查一块方圆为2hm2的草场中灰苍鼠的数量时，放置了100个捕鼠笼，一夜间捕获了50只，将捕获的灰苍鼠做好标记后在原地放生。5天后，在同一地点再放置同样数量的捕鼠笼，捕获了52只，其中有上次标记的个体13只。由于灰苍鼠被捕一次后更难捕捉，因此推测该草场中灰苍鼠的种群数量最可能（）
A小于100只B大于100只C小于200只D大于200只
答案：C
2.抽样检测法
（1）计算公式：
1×1×01mm3400个小格中的酵母菌数（a）=1×103mm3×稀释倍数（b）M
解释：等式的左边相当于从中抽样出来的400小格（规格为1×1×01mm3）中所含的酵母菌数，等式的右边即为原1ml培养液（稀释b倍后）中的酵母菌的数量为M个。
（2）误差分析：
根据公式：1×1×01mm3400个小格中的酵母菌数（a）=1×103mm3×稀释倍数（b）M
得M=1×104×a×b的值。（误差值主要来自于a的值）
ⅠM偏小的情况：
①每次取样时未振荡摇匀，而取了上层的液体，导致a值偏小；
②血球计数板中有气泡，导致a值偏小；
③在抽样检测时，让培养液自行渗入后，没有稍待片刻，直接就放在载物台上观察，（没有让酵母菌全部沉到计数室底部），导致a值偏小。
Ⅱ.M偏大的情况：
①每次取样时未振荡摇匀，而取了下层的液体，导致a值偏大；
②先滴加菌液，再加盖玻片（压滴法），计数结果将偏高；（因为先滴加菌液，再加盖玻片时，容易使菌液沾到计数平台两侧的支持柱表面，在支持柱表面形成一层水膜而使盖片不能完全落在支持柱上。盖玻片由于液滴的表面张力作用而未能严密地盖到计数板表面上，使计数室内的体积增大）
③在抽样检测时，让培养液自行渗入后，停留时间过长，然后才放到载物台上去观察，可能由于酵母菌的增殖，导致a值偏大；（为了减少误差，取出的样液中需立即加入固定液，维持酵母菌细胞数目不变） ④未染色，统计的菌体数包含了死亡的菌体，也会导致a值偏大。
3.这两种方法的比较：抽样检测法的实质与标志重捕法相似，计算时，只要抓住等式两边所代表的含义。（学生在做这类题目中常做常错的原因是没有抓住抽样检测的本质）。
【例3】（2011年江苏高考变式）下图为不同培养阶段酵母菌种群数量、葡萄糖浓度和乙醇浓度的变化曲线，请回答下列问题：
（1）某同学在T3时取样，统计的酵母菌种群数量明显高于D点对应的数量，原因可能有、和用血球计算板计数时出现错误等。
（2）某同学在T3时取样，统计的酵母菌种群数量明显低于D点对应的数量，可能有、等原因引起的。
参考答案：
（1）取样时培养液未摇匀，从底部取样未染色，统计的菌体数包含了死亡的菌体
（2）取样时培养液未摇匀，从上层取样血球计数板中有气泡
三、稀释涂布平板法和血球计数板（抽样检测）计数法比较
1稀释涂布平板法
真正的光明决不是永没有黑暗的时间，只是永不被黑暗所掩蔽罢了。
文学能让我们意识到自己的匮乏，还有生活中那些已经削弱我们并正在让我们气喘吁吁的东西。
是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基表面，进行培养。在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个菌落。
2计算公式：
01ml菌落数（a）=10ml×稀释倍数（b）M
3两种方法的比较
稀释涂布平板法与血球计数法的抽样检测法的本质是一样的，都是从稀释后的试管中取样，根据计数所抽取样液中菌体的数目来估算出原样液中菌体的数目，当然涂布的时候取多少毫升则要根据培养皿的大小来确定。
4误差分析
稀释涂布法的误差主要来自于上述公式中的菌落（a），由于在涂布平板的时候可能有的菌体没有完全分开，所以测得的菌落数要比实际培养液中菌体数要偏小。
【例4】某同学在稀释倍数为105的培养基中测得平板上菌落数的平均值为234，那么每毫升样品中的菌落数是（涂布平板时所用稀释液的体积为02mL）。用这种方法测定密度，实际活菌数量要比测得的数量，因为。
参考答案：
117×107多当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察的是一个菌落
不同的生物所采用的种群密度的调查方法是不相同的，但其本质都渗透着抽样的思想，只要理解抽样计算的实质，各种难点都能迎刃而解，真正达到举一反三、触类旁通的效果。
一、样方法与血球计数板抽样检测法的比较
1样方法
样方法是在被调查种群的生活环境内，随机选取若干个样方，通过计数每一个样方内的个体数，求得每个样方的种群密度，以所有样方种群密度的平均值作为该种群的种群密度。
（1）适合对象：植物和活动范围比较小的动物）（如昆虫的卵的密度等）
（2）常用方法：样方形状可以多样，但取样的关键要保证随机性和代表性，常见的取样方法有五点取样法（图A）和等距离取样法（图B）。
2血球计数板计数法
（1）适合对象：指针对细胞悬液中细胞数量的计数，常用于个体较大的细胞或菌体（如人体血细胞、酵母菌等），不适合于普通的细菌（如大肠杆菌）和病毒。
（2）种类：它的规格有两种，一种叫希利格式（16×25型）（如图D），另一种叫汤麦式（25×16型）（如图E）所示。
（3）计算公式：每毫升培养液中酵母菌细胞的计算公式为：
酵母细胞个数/mL=所数小方格中细胞总数×400×104×b所数的小方格数（a）
3两种方法的比较
图汤麦式（如图E）这种计数方法的实质就是五点取样法。
【例1】蓝澡是湖泊中常见的藻类，在调查环境因素对藻类生长的影响时，需要每天定时对藻类进行取样计数。
（1）取出的样液中需立即加入固定液，其目的是。
（2）在计数前通常需要将样液稀释，这是因为。
（3）将样液稀释100倍，采用血球计数板（规格为1mm×1mm×0.1mm）计数，观察到的计数室中细胞分布图见下图，则培养液中藻细胞的密度是个/mL。
参考答案：
（1）维持藻细胞数目不变
（2）藻细胞密度过大
（3）1×108
任何地方只要你爱它，它就是你的世界。
我坚信，人应该有力量，揪着自己的头发把自己从泥地里拔起来。
二、标志重捕法与血球计数板抽样检测法的比较及误差分析
1标志重捕法
在一个有比较明确界限的区域内，捕捉一定数量的动物个体进行标志，然后放回，经过一个适当时期（标志个体与未标志个体重新充分混合分布）后，再进行重捕。根据重捕样本中标志者的比例，估计该区域的种群总数，可计算出某种动物的种群密度。
（1）计算公式
m/M=n/N（区域内动物的数量为M，捕获并标记（数量为m），重捕计数（捕获N、标记n）
分析：n/N即为重捕中标志的个体占所捕到的总个体的比例，m/M即为区域内标志的个体占所有个体的比例。其核心是抓住等式两边的比例相等，从而求出M=m·N/n，标志重捕法的前提是，标志个体与未标志个体在重捕时被捕的概率相等。
但对于此等式中，m、N都是一个定值，每次重捕时，主是要n带来的误差。
（2）误差分析
①M值偏小的情况：标记物过于醒目，（易于被人为捕捉到）所以每次重捕时n值偏大，所以计算出的M值偏小。
②M值偏大的情况：a标记物易脱落，所以每次重捕时n值偏小，所以计算出的M值偏大。b在实际捕捉的过程，如田鼠在被捕捉过一次后更难捕捉，所以重捕时，n值偏小，M值就偏大。c标记物过于醒目，（易于被生活环境中的天敌发现而捕食），则n值偏小，M值就偏大
【例2】某科技小组在调查一块方圆为2hm2的草场中灰苍鼠的数量时，放置了100个捕鼠笼，一夜间捕获了50只，将捕获的灰苍鼠做好标记后在原地放生。5天后，在同一地点再放置同样数量的捕鼠笼，捕获了52只，其中有上次标记的个体13只。由于灰苍鼠被捕一次后更难捕捉，因此推测该草场中灰苍鼠的种群数量最可能（）
A小于100只B大于100只C小于200只D大于200只
答案：C
2.抽样检测法
（1）计算公式：
1×1×01mm3400个小格中的酵母菌数（a）=1×103mm3×稀释倍数（b）M
解释：等式的左边相当于从中抽样出来的400小格（规格为1×1×01mm3）中所含的酵母菌数，等式的右边即为原1ml培养液（稀释b倍后）中的酵母菌的数量为M个。
（2）误差分析：
根据公式：1×1×01mm3400个小格中的酵母菌数（a）=1×103mm3×稀释倍数（b）M
得M=1×104×a×b的值。（误差值主要来自于a的值）
ⅠM偏小的情况：
①每次取样时未振荡摇匀，而取了上层的液体，导致a值偏小；
②血球计数板中有气泡，导致a值偏小；
③在抽样检测时，让培养液自行渗入后，没有稍待片刻，直接就放在载物台上观察，（没有让酵母菌全部沉到计数室底部），导致a值偏小。
Ⅱ.M偏大的情况：
①每次取样时未振荡摇匀，而取了下层的液体，导致a值偏大；
②先滴加菌液，再加盖玻片（压滴法），计数结果将偏高；（因为先滴加菌液，再加盖玻片时，容易使菌液沾到计数平台两侧的支持柱表面，在支持柱表面形成一层水膜而使盖片不能完全落在支持柱上。盖玻片由于液滴的表面张力作用而未能严密地盖到计数板表面上，使计数室内的体积增大）
③在抽样检测时，让培养液自行渗入后，停留时间过长，然后才放到载物台上去观察，可能由于酵母菌的增殖，导致a值偏大；（为了减少误差，取出的样液中需立即加入固定液，维持酵母菌细胞数目不变） ④未染色，统计的菌体数包含了死亡的菌体，也会导致a值偏大。
3.这两种方法的比较：抽样检测法的实质与标志重捕法相似，计算时，只要抓住等式两边所代表的含义。（学生在做这类题目中常做常错的原因是没有抓住抽样检测的本质）。
【例3】（2011年江苏高考变式）下图为不同培养阶段酵母菌种群数量、葡萄糖浓度和乙醇浓度的变化曲线，请回答下列问题：
（1）某同学在T3时取样，统计的酵母菌种群数量明显高于D点对应的数量，原因可能有、和用血球计算板计数时出现错误等。
（2）某同学在T3时取样，统计的酵母菌种群数量明显低于D点对应的数量，可能有、等原因引起的。
参考答案：
（1）取样时培养液未摇匀，从底部取样未染色，统计的菌体数包含了死亡的菌体
（2）取样时培养液未摇匀，从上层取样血球计数板中有气泡
三、稀释涂布平板法和血球计数板（抽样检测）计数法比较
1稀释涂布平板法
真正的光明决不是永没有黑暗的时间，只是永不被黑暗所掩蔽罢了。
文学能让我们意识到自己的匮乏，还有生活中那些已经削弱我们并正在让我们气喘吁吁的东西。
是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基表面，进行培养。在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个菌落。
2计算公式：
01ml菌落数（a）=10ml×稀释倍数（b）M
3两种方法的比较
稀释涂布平板法与血球计数法的抽样检测法的本质是一样的，都是从稀释后的试管中取样，根据计数所抽取样液中菌体的数目来估算出原样液中菌体的数目，当然涂布的时候取多少毫升则要根据培养皿的大小来确定。
4误差分析
稀释涂布法的误差主要来自于上述公式中的菌落（a），由于在涂布平板的时候可能有的菌体没有完全分开，所以测得的菌落数要比实际培养液中菌体数要偏小。
【例4】某同学在稀释倍数为105的培养基中测得平板上菌落数的平均值为234，那么每毫升样品中的菌落数是（涂布平板时所用稀释液的体积为02mL）。用这种方法测定密度，实际活菌数量要比测得的数量，因为。
参考答案：
117×107多当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察的是一个菌落
不同的生物所采用的种群密度的调查方法是不相同的，但其本质都渗透着抽样的思想，只要理解抽样计算的实质，各种难点都能迎刃而解，真正达到举一反三、触类旁通的效果。