【摘 要】
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目的:探讨Yes相关蛋白(YAP)在体外牵张力介导的人牙周膜细胞(h PDLCs)成骨分化中的作用。方法:酶消化法分离并体外培养h PDLCs,取第3~8代细胞用于实验。首先通过细胞免疫荧光
【机 构】
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武汉大学口腔医学院口腔基础医学省部共建国家重点实验室培训基地和口腔生物医学教育部重点实验室; 武汉大学口腔医院正畸二科;
【基金项目】
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国家自然科学基金面上项目(81371169,81771111)
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目的:探讨Yes相关蛋白(YAP)在体外牵张力介导的人牙周膜细胞(h PDLCs)成骨分化中的作用。方法:酶消化法分离并体外培养h PDLCs,取第3~8代细胞用于实验。首先通过细胞免疫荧光检测YAP在细胞加力后的定位,然后利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测加力细胞成骨分化相关基因碱性磷酸酶(ALP)、远端缺失同源盒5(DLX5)、Runt相关转录因子2(RUNX2)的表达变化,通过碱性磷酸酶染色实验检测加力细胞ALP的活性。构建YAP基因沉默模型,分析加力的细胞的YAP基因表达受到抑制后成骨分化相关基因ALP、DLX5及RUNX2的表达变化和ALP活性。结果:h PDLCs加力1 d后,同对照组相比,胞核定位的YAP明显升高,且成骨相关基因的表达均明显上调(P<0.05),ALP活性也增强。转染了YAP SiRNA的细胞加力后与对照组相比,成骨相关基因的表达明显受到抑制(P<0.05),且ALP活性也降低。结论:沉默YAP基因对牵张力介导的h PDLCs成骨分化有抑制作用,推测YAP可能是正畸过程中的一个潜在治疗靶点。
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