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第一部分振动治疗对卒中后偏侧忽略短期疗效探索目的探讨颈部肌肉振动对于改善脑卒中后患者偏侧忽略症状的作用,评估其短期疗效。方法2016年12月至2018年10月在南京市栖霞区医院康复医学科住院的脑卒中伴偏侧忽略患者共40例,包括脑梗死23例及脑出血17例。随机分为对照组20例和肌肉振动组20例,两组均针对偏侧忽略进行康复训练,振动组增加颈部肌肉振动治疗。治疗参数:振动频率108 Hz,振幅1.0 mm,振动部位均为左侧斜方肌。治疗频率每日一次,一次15 min。治疗前和治疗3周后采用中国行为性忽略测试-香港版量表（CBIT-HK）进行评估,并分别比较常规测试评分、行为测试评分及总评分。分别对数据进行组内和组间比较,得出结论。认为P＜0.05方才具有统计学意义。结果3周后振动组治疗前后常规评分t=-4.784,P＜0.05;行为评分t=-5.300,P＜0.05;总评分t=-4.647,P＜0.05。对照组常规评分t=-3.956,P＜0.05;行为评分t=-4.340,P＜0.05;总评分t=-2.303,P＜0.05,肌肉振动组及对照组患者治疗后CBIT-HK常规评分、行为评分及总评分均较治疗前有所提高;振动组和对照组效果比较,t检验结果显示:行为分差值的t=3.155,P＜0.05,总评分差值t=2.786,P＜0.05,振动组明显优于对照组;而常规分差值t=1.841,P=0.074,两组常规测试比较无统计学意义。结论颈部肌肉振动治疗可短期改善偏侧忽略。在常规康复训练基础上增加颈部肌肉振动治疗是改善脑卒中后偏侧忽略症状的有效手段。第二部分小鼠脑卒中后偏侧忽略的分子机制研究目的本研究拟建立小鼠脑卒中后偏侧忽略模型,通过调控脑皮层micro RNA-320水平,探讨micro RNA-320对卒中后偏侧忽略脑损伤的作用,为脑卒中后偏侧忽略的治疗提供参考。方法本研究共选取48只清洁级雄性小鼠作为研究对象,随机分为四组:对照组（12只）,模型组（脑卒中后偏侧忽略组,12只）,Micro RNA-320模拟组（12只）,micro RNA-320抑制剂组（12只）。Q-RTPCR检测:使用Prime Scfipt RT Master Mix从总RNA中逆转录总c DNA,使用SYBR premix Ex Taq在ABI Biosystems上进行实时定量PCR,并检测目标基因（包括IGF-1,GAPDH,mi RNA-320-3p和U6）表达水平。WB检测:从小鼠脑组织梗死皮层提取总蛋白,并使用BCA检测试剂盒测定蛋白浓度。含80mg蛋白的样品在12%SDS聚丙烯酰胺凝胶上进行电泳分离。随后,将蛋白质转移到聚偏氟乙烯膜上,在室温下用5%脱脂奶粉封闭2小时,并与兔抗TLR4（1:300,美国Abcam）、抗Ik B（1:2000,美国Proteintech）、抗A20（1:2000,prointech）,抗GAPDH（1:200,博斯特,中国）,4℃摇瓶过夜,然后用相应的HRP结合二级抗体（博斯特）孵育。最后,加入ECL溶液,用Image J软件对图像进行灰度分析。Tunel检测:福尔马林固定的额叶皮质组织石蜡包埋,4-mm厚切片,每层5片,切片机切片。切片用TUNEL法检测凋亡细胞。TUNEL试剂盒购买于德国曼海姆罗氏分子生化公司,实验按照制造商协议进行。细胞核浓缩的凋亡细胞呈褐色,正常细胞大而圆,不染色。阳性细胞在光镜下由一名对实验组不知情的研究者进行分析。用TUNEL positive细胞百分率评价脑损伤程度。TTC染色:采用2,3,5-三苯基四唑（TTC）染色法测定脑梗死面积。脑缺血再灌注损伤24小时后,小鼠在深麻醉下用戊巴比妥钠（静脉注射100mg/kg）安乐死。快速取出大脑并在-20°C下冷冻10分钟。然后,使用脑切片机切割厚度为2 mm的切片,在37°C的黑暗处用2%TTC溶液（Sigma,USA）染色20分钟,然后用4%多聚甲醛固定过夜。正常脑组织呈暗红色,而侵犯区仍呈浅白色。由一名对实验条件不敏感的观察者使用imageproplus6分析梗死面积,并计算梗死面积占总面积的百分比。结果（1）模型组与对照组相比,micro RNA-320的表达略有增加（P＜0.05）;与模型组相比,micro RNA-320类似物组中micro RNA-320的表达明显上调（P＜0.01）,micro RNA-320抑制剂组中micro RNA-320的表达下调（P＜0.05）。（2）模型组损伤皮层IGF-1 m RNA的表达较对照组增加（P＜0.05）;与模型组相比,micro RNA-320类似物组IGF-1 m RNA的表达水平降低（P＜0.05）,micro RNA-320抑制剂组中IGF-1 m RNA的表达水平明显高于模型组。对照组（P＜0.01）。（3）模型组损伤皮层IGF-1蛋白表达明显低于对照组（P＜0.05）;与模型组相比,micro RNA-320类似物组的IGF-1蛋白表达降低（P＜0.05）,而在mi RNA-320抑制剂组中的IGF-1蛋白表达明显高于模型组。（4）与对照组相比,模型组梗塞区外周血细胞凋亡明显增加（P＜0.05）,mi RNA-320模拟治疗进一步加重了梗塞区外周血细胞凋亡。脑卒中后被忽视的半小鼠的皮质梗死水平（P＜0.05）,micro RNA-320抑制剂处理降低了脑卒中小鼠的皮质梗死周围区域的细胞凋亡水平（P＜0.05）。（5）模型组脑梗死体积及水肿程度较对照组明显增加（P＜0.01）;与模型组相比,micro RNA-320类似物组的脑梗死体积和水肿程度明显增加（P＜0.05）;micro RNA-320抑制剂组的脑梗死体积和水肿程度明显降低（P＜0.01）。结论脑卒中后偏侧忽略患者发生脑缺血-再灌注损伤的几率比较大,在此过程中,mi RNA-320可能通过IGF-1因子来调控对脑组织损伤的程度,这可能是脑卒中后偏侧忽略患者发生脑缺血-再灌注损伤的重要作用机制,为脑卒中后偏侧忽略患者脑组织损伤的治疗提供靶点。