淫羊藿是一种重要的道地药材,具有增强机体免疫功能、抗衰老、抗骨质酥松和抗肿瘤等功效,其主要活性成分是淫羊藿黄酮。前期研究表明淫羊藿苷类衍生物能够通过增强机体自身免疫系统有效杀伤肿瘤细胞,是一类颇具潜力的天然小分子抗癌药物。目前临床上广泛应用的抗肿瘤免疫药物多以抗体等生物大分子为主,小分子免疫抗肿瘤药物的报道很少。近期,淫羊藿苷类衍生物中的淫羊藿素（阿可拉定）作为国产1类新药用于治疗晚期肝癌已经获批。然而,淫羊藿次苷Ⅰ作为一种从淫羊藿中另外一种微量活性化合物,由于其含量极低（十万分之一）,仅依靠化学分离提取的方法很难批量获取,因此目前相关淫羊藿次苷Ⅰ的研究与开发鲜有报道,本论文基于研究淫羊藿的整体免疫调节功能,采用免疫学、代谢组学和微生物组学等技术系统评价了淫羊藿次苷Ⅰ的安全性和生物活性及其抗肿瘤的免疫代谢分子机制,主要研究内容如下:首先,本文针对淫羊藿次苷Ⅰ进行了体内体外安全性评价。体外细胞实验发现淫羊藿次苷Ⅰ具有一定的细胞毒性,其多种癌细胞IC50的阈值范围在20-35μM。体内实验探究了不同剂量淫羊藿次苷Ⅰ（5,20,80,160,320,640 mg/kg体重）灌胃给药对小鼠可能的毒副作用和免疫功能影响。结果发现淫羊藿次苷Ⅰ即使在640mg/kg体重的高剂量作用下,其对小鼠肝肾等主要脏器的功能均没有显著影响或损伤,表明淫羊藿次苷Ⅰ的毒副作用很小,且其安全用药范围比较宽。流式细胞术实验发现淫羊藿次苷Ⅰ能显著提高正常小鼠外周血中多类免疫细胞亚群的比例,表明淫羊藿次苷Ⅰ具有一定的系统免疫增强作用。基于淫羊藿次苷Ⅰ的安全性评价结果,我们选取了两个较低剂量（5和20mg/kg体重）的淫羊藿次苷Ⅰ、黑色素瘤小鼠和黑色素瘤细胞模型作为研究对象,深入研究了淫羊藿次苷Ⅰ的抗肿瘤免疫代谢分子机制。研究发现淫羊藿次苷Ⅰ能够显著增强了肿瘤微环境（肿瘤组织）中的CD8+T细胞及其IFN-γ,且能够与蛋白吲哚胺2,3-双加氧酶1（IDO1）相互作用,抑制了色氨酸向犬尿酸的转化,将肿瘤细胞的“免疫逃逸”通路从IDO1-Kyn-AhR级联转化为JAK1-STAT1通路,成功阻断IFN-γ诱导的肿瘤“免疫逃逸”并激活STAT1磷酸化而产生大量凋亡蛋白,从而诱导肿瘤细胞凋亡。这些发现表明淫羊藿次苷Ⅰ可能作为一种靶向Kyn-AhR通路用于肿瘤免疫治疗的天然小分子抗癌药物。肠道微生物作为机体最大的免疫器官,显而易见,肠道菌群的调节为肿瘤免疫治疗提供了机遇。本文结合微生物组学和代谢组学,进一步研究了淫羊藿次苷Ⅰ通过调节荷瘤小鼠肠道菌群辅助肿瘤免疫治疗的分子机制。结果发现不同剂量淫羊藿次苷Ⅰ（5、20和80 mg/kg体重）均能显著改善荷瘤小鼠的肠道屏障和免疫力以及紊乱的肠道菌群多样性和微生物组成,尤其是显著上调了肠道中两种益生菌（乳酸杆菌和双歧杆菌）的丰度,并显著提高微生物代谢物如短链脂肪酸和吲哚代谢物的水平,降低机体的系统性炎症水平,从而显著抑制了小鼠肿瘤生长,这些结果表明淫羊藿次苷Ⅰ能通过肠道菌群调节辅助癌症免疫治疗。综上所述,本论文采用免疫学、靶向代谢组学和微生物组学技术结合分子生物学手段,详细研究了中草药淫羊藿微量活性成分淫羊藿次苷Ⅰ的安全性及抗肿瘤免疫代谢分子机制。为淫羊藿等道地药材的药效物质基础研究提供了翔实的基础数据和新思路。